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一種精確熒光定量檢測方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-08
  • 技術(shù)成熟度:可以量產(chǎn)
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201710236713.1 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種精確熒光定量檢測方法 
  • 項(xiàng)目單位 程秋萍
  • 發(fā)明人 程秋萍,王云志 
  • 行業(yè)類別 智慧健康-互聯(lián)網(wǎng)+平臺
  • 技術(shù)成熟度 可以量產(chǎn)
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 吳亞霜
  • 發(fā)布時間 2021-09-08  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    本發(fā)明公開了一種精確熒光定量檢測方法,特別涉及一種利用熒光融合蛋白的精確定量檢測方法,并且提供了一種熒光融合蛋白,以及精確熒光定量檢測試劑條、試劑盒及其制備方法。使用本發(fā)明的方法以及試劑條,能夠增加檢測靈敏度,減少反應(yīng)時間,減少成本。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種制備用于精確熒光定量檢測的試紙條,其特征在于,取血液,混入磷酸鹽緩沖液后加到試紙條的加樣墊上,所述試紙條包含有cTNI單克隆抗體熒光融合蛋白復(fù)合物,所述熒光融合蛋白為熒光蛋白-ProteinG融合蛋白或熒光蛋白-ProteinA融合蛋白,所述的復(fù)合物為熒光融合蛋白和抗體按1:2摩爾比制備而成;所述熒光融合蛋白中蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.根據(jù)權(quán)利要求1的所述試紙條,其特征在于,所述熒光蛋白為紅色熒光蛋白。3.一種熒光融合蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。4.包含權(quán)利要求3所述熒光融合蛋白的編碼DNA、載體以及重組菌。5.一種精確熒光定量檢測試劑條,其特征在于,所述試劑條包含硝酸纖維素膜-PVC底板、吸水墊、樣品墊、熒光結(jié)合墊,所述熒光結(jié)合墊中包含抗體-熒光融合蛋白復(fù)合物,所述熒光融合蛋白為熒光蛋白-proteinG融合蛋白或熒光蛋白-proteinA融合蛋白;所述熒光融合蛋白中蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑條,其特征在于,所述熒光融合蛋白為SEQ ID NO:1所示的蛋白。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑條,其特征在于,所述熒光融合蛋白和抗體1:2摩爾比混合后,通過分子篩純化形成抗體-熒光蛋白復(fù)合物。8.根據(jù)權(quán)利要求6-7任意一項(xiàng)所述的試劑條,其特征在于,所述硝酸纖維素膜切成Y型細(xì)條。9.根據(jù)權(quán)利要求6-7任意一項(xiàng)所述的試劑條,其特征在于,熒光標(biāo)記物還可以是熒光微球,熒光分子或過渡元素。10.一種精確熒光定量檢測試紙條的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:1)硝酸纖維素膜(NC膜)-PVC底板的制備:將硝酸纖維素膜切成Y型細(xì)條,貼在PVC底板上,將鼠抗人單抗在硝酸纖維素膜上劃線得到檢測線;將兔抗鼠在硝酸纖維素膜上劃線得到質(zhì)控線,然后將硝酸纖維素膜-PVC底板置于干燥箱干燥;2)將熒光融合蛋白和抗體1:2摩爾比混合后,通過分子篩純化得到抗體-熒光蛋白復(fù)合物,保存?zhèn)溆茫?)結(jié)合墊的制備:將結(jié)合墊切成細(xì)條,將鼠抗人cTNI單克隆抗體熒光蛋白復(fù)合物、按照2:1混合,均勻鋪在結(jié)合墊上,放入烘箱烤干;4)樣品墊的制備:將玻璃纖維膜切成細(xì)條;5)吸收墊的制備:將吸水紙切成細(xì)條;7)組裝:將上述吸水墊、樣品墊、熒光結(jié)合墊依次貼在PVC底板上,切成合適形狀的試劑條;所述熒光融合蛋白中蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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專利技術(shù)附圖

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