1.一種白芨共生菌的培育方法,步驟如下:
(1)白芨塊莖根的消毒處理:取新鮮野生白芨塊莖根部用清水沖洗3~5次除去泥砂雜
質,用洗衣粉水浸泡15~25min后,用無菌水沖洗4~5次,然后用75%乙醇浸泡25~30s后,用
無菌水沖洗3~5次,用0.1~0.2%HgC12浸泡6~8min后無菌水沖洗5~6次,用無菌濾紙吸干
水分;
(2)白芨共生菌的提取:將步驟(1)消毒處理后的白芨塊莖根在超凈工作臺上用經消毒
的剪刀剪成長0.2~0.5cm小段,接入滅菌后的PDA培養基上,在24~26℃溫度下暗培養,接
種后7~8天獲得長滿整個培養基表面3~4cm長的白芨共生菌;
其特征是,還有如下步驟:
(3)白芨共生菌的提純:將試管截去底部,管內中間裝入木屑和闊葉樹樹葉配制的培養
基,兩端加棉塞滅菌后,從一端接入步驟(2)提取得到的菌絲體后,在24~26℃溫度下暗培
養,菌絲吃料后向木屑深處延伸至另一端,15~20天后從另一端獲取純化菌種;
(4)白芨共生菌的復壯:將步驟(3)得到的提純菌種轉接到滅菌后的RM改良培養基上,
在24~26℃溫度下暗培養, 7~8天后得到菌絲健壯的優良菌種;所述的復壯用RM改良培養
基配方為:蛋白胨2克,葡萄糖20克,磷酸二氫鉀0.46克,磷酸氫二鉀1克,硫酸鎂0.5克,瓊脂
15~20克,馬鈴薯200克,蒸餾水1000毫升;
(5)白芨共生菌的原種擴繁:將原種培養基裝入玻璃培養瓶容積的2/3后,蓋上棉塞滅
菌后接入步驟(4)得到的復壯菌種,在24~26℃溫度下暗培養,25~30天后菌絲長到瓶底,
得到白芨共生菌的原種,原種培養基的質量百分比為:雜木屑39%,闊葉樹樹葉39%,麩皮
20%,蔗糖1%,碳酸鈣1%,料水質量比為1:1.3~1.5;
(6)白芨共生菌的栽培種擴繁:將栽培種培養基裝入高密度低壓聚乙烯塑料袋內滅菌,
冷卻后接入步驟(5)得到的白芨共生菌的原種,在2~23℃溫度下暗培養,28~36天后得到
白芨共生菌的栽培種,栽培種培養基的質量百分比為:雜木屑30%,闊葉樹樹葉48%,麥麩皮
10%,玉米粉10%,蔗糖1%,石膏粉1%,料水質量比為1:1.3~1.5。
2.根據權利要求1所述的白芨共生菌的培育方法,其特征是白芨共生菌的提純培養基
的質量百分比為:雜木屑60%,闊葉樹樹葉30%,麩皮8%,蔗糖1%,石膏粉1%,料水質量比為1:
1.3~1.6。
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