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一種發(fā)酵生產(chǎn)2,3-丁二醇的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-07-29
  • 技術(shù)成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN200610027146.0 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種發(fā)酵生產(chǎn)2,3-丁二醇的方法 
  • 項目單位 華東理工大學(xué)
  • 發(fā)明人 沈亞領(lǐng),魏東芝,曹學(xué),李元芳,朱虎,王學(xué)東 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-原料藥
  • 技術(shù)成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 秦雪鳳
  • 發(fā)布時間 2021-07-29  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開了一種發(fā)酵生產(chǎn)2,3-丁二醇的方法。將粘質(zhì)沙雷氏菌種子液接種于培養(yǎng)基中,通入空氣,攪拌,RQ控制在0.9~1.2之間;然后補入產(chǎn)物促進因子,補充蔗糖水溶液和氨基酸水溶液,RQ控制在1.5~1.8之間;最后補入蔗糖水溶液將RQ控制在1.9~2.2之間,發(fā)酵培養(yǎng),即獲得含有2,3-丁二醇的發(fā)酵培養(yǎng)液。本發(fā)明的方法采用單因子實驗、正交實驗、響應(yīng)面實驗相結(jié)合的靜態(tài)優(yōu)化方法,優(yōu)化了培養(yǎng)基,并采用RQ來調(diào)控生產(chǎn)2,3-丁二醇的生產(chǎn),通過分階段調(diào)控,使得2,3-丁二醇產(chǎn)量獲得大幅提高,2,3-丁二醇產(chǎn)量達到107g/L以上,轉(zhuǎn)化率達0.45g/g suc以上,生產(chǎn)能力為2.91g/L·h以上,具有工業(yè)化推廣應(yīng)用的前景。
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  • 02

    說明書

    1.一種發(fā)酵生產(chǎn)2,3-丁二醇的方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)采用常規(guī)的方法培養(yǎng)粘質(zhì)沙雷氏菌CICC10187;(2.1)將步驟(1)的粘質(zhì)沙雷氏菌CICC10187種子液基于培養(yǎng)基體積的5~7%的接種量接種于培養(yǎng)基中,通入空氣,攪拌,呼吸商控制在0.9~1.2之間,在25~35℃下發(fā)酵培養(yǎng)3-6小時,其中空氣流量為20~120m3/h·m3培養(yǎng)基,攪拌速度為100~500rpm;(2.2)然后補入產(chǎn)物促進因子—乙酸鈉,流速為(0.1g~15g)/h·m3培養(yǎng)基,呼吸商控制在1.5~1.8之間,在25~35℃下發(fā)酵培養(yǎng)15-18小時,其中空氣流量為100~150m3/h·m3培養(yǎng)基,攪拌速度為300~800rpm,蔗糖水溶液補料量使培養(yǎng)基中的蔗糖的濃度維持在0~20g/L;當菌體比生長速率<0.03時補入氨基酸粉水溶液;當呼吸商值下降或者發(fā)酵液中靈菌紅素的量增加時,則降低流速;當OD600大于25~30時停止補入;(2.3)最后將呼吸商控制在1.9~2.2之間,在25~35℃下發(fā)酵培養(yǎng)32-36小時,即獲得含有2,3-丁二醇的發(fā)酵培養(yǎng)液,其中空氣流量為20~150m3/h·m3培養(yǎng)基,攪拌速度為200~800rpm,蔗糖水溶液補料量使培養(yǎng)基中的蔗糖的濃度維持在0~20g/L,此階段不補入氨基酸粉水溶液;pH值在發(fā)酵過程中用NaOH和H2SO4控制為5.5-6.5,其中發(fā)酵培養(yǎng)基的組分和重量含量為:蔗糖1~10%,蛋白胨0.5~2%,酵母粉0.1~0.5%,檸檬酸0.3~1.5%,MnSO40.002~0.01%,KH2PO4?0.01%~0.1%,F(xiàn)eSO4·7H2O?0.001~0.01%,MgSO4?0.01~0.1%,以及余量的水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,培養(yǎng)基制備方法包括如下步驟:(1)將酵母粉、蛋白胨、檸檬酸、MnSO4、KH2PO4、MgSO4加水溶解;(2)稱取FeSO4·7H2O加20ml水溶解,加3ml濃度為1/4(v/v)的鹽酸助溶,使溶液較澄清,用無菌過濾膜過濾;(3)將步驟1和2的產(chǎn)物混合,用3~7mol/l的NaOH溶液調(diào)pH至7.20,按照比例加水,滅菌;(4)將滅好菌的蔗糖與步驟(3)已冷卻好的培養(yǎng)基混合。?
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專利技術(shù)附圖

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