本發明公開一種重組畢赤酵母高密度發酵工藝，特別是采用全自動控制發酵罐進行發酵的工藝。本發明的工藝方法是將工作種子接種于BSM培養基中，培養溫度為28℃，并進行攪拌，加氨水或磷酸控制發酵體系的pH值為4.8，罐壓為0.8個大氣壓，當發酵罐中的甘油耗盡后一次緩慢加入甘油溶液280ml，待甘油再次徹底耗盡后，分五次緩慢加入每升含PTM12ml的甲醇溶液進行甲醇誘導，誘導72小時后結束發酵。

1.豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18重組巴斯德畢赤酵母的高密度發酵方法，其特征是從劃線的YPD平板上挑取一個豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18重組畢赤酵母單克隆菌落到一級種子YPD培養基中培養菌體濃度OD₆₀₀達到6.0，得到一級種子培養液；再將上述培養液倒入含體積比為50％的BSM發酵罐培養基的YPD二級種子培養基中培養至菌體濃度OD₆₀₀達到40.0，得到發酵工作種子液，再按10％的接種量接種于BSM培養基中，培養溫度為28℃，并進行攪拌，加氨水或磷酸控制發酵體系的pH值為4.8，罐壓為0.8個大氣壓，校正溶氧DO達100％，當發酵罐BSM培養基中的甘油耗盡后，以0.67ml/min的流速緩慢加入每升含12mlPTM₁的50％甘油溶液7小時，待補加的甘油再次徹底耗盡后，分五次緩慢加入每升含PTM₁12ml的甲醇溶液進行甲醇誘導，首次加入甲醇溶液30ml，第二次加入甲醇溶液60ml，當甲醇耗盡后，再次以0.25ml/min的流速加入甲醇溶液360ml，誘導表達24小時后，第四次以0.5ml/min的流速加入甲醇溶液360ml，誘導12小時后，最后一次以0.6ml/min的流速加入甲醇溶液1296ml，36小時后結束發酵。