本發(fā)明涉及一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，包括：(1)配制標(biāo)準(zhǔn)品母液，梯度稀釋，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)調(diào)整色譜條件；(3)PDB搖瓶培養(yǎng)食用菌，過濾離心后取上清液待用；(4)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的方法檢測培養(yǎng)基質(zhì)和樣品中甲酸的含量。本發(fā)明的方法簡單，有很好的精密度和穩(wěn)定性，能快速準(zhǔn)確的檢測出食用菌發(fā)酵液中甲酸的含量，一經(jīng)檢測系統(tǒng)確定可對相應(yīng)培養(yǎng)模式或生長環(huán)境中的食用菌培養(yǎng)液中的甲酸進(jìn)行長期、穩(wěn)定的監(jiān)測。

1.一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，包括：
(1)分別取草酸、檸檬酸、酒石酸、甲酸、丁酸標(biāo)準(zhǔn)品置于容量瓶中，加超純水定容作儲(chǔ)備
液；將儲(chǔ)備液稀釋配制不同濃度的混標(biāo)，進(jìn)樣分析，根據(jù)峰面積和有機(jī)酸含量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)選用SH1011柱和KC-811柱為分析柱，SH-G柱為保護(hù)柱，色譜條件為：流動(dòng)相4mmol/L
高氯酸溶液，柱溫為60℃，流動(dòng)相流速1.0mL/min，紫外可見檢測器檢測，波長210nm；其
中，三個(gè)色譜柱串聯(lián)使用，串聯(lián)先后順序?yàn)镾H-G柱串聯(lián)SH1011柱串聯(lián)KC-811柱；
(3)取待測食用菌斜面培養(yǎng)物，活化后打碎，接入到PDB液體培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)，
定期取樣，無紡布過濾菌絲，濾液離心后取上清液備用；
(4)分別取步驟(3)中的上清液1mL，濾膜過濾后上樣，上樣量10μL，采用和標(biāo)準(zhǔn)品相同
的條件重復(fù)檢測；根據(jù)樣品對應(yīng)甲酸的峰面積和標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中甲酸的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(1)中的不同濃度具體為草酸200μg/mL，檸檬酸200μg/mL，酒石酸200μg/mL，
甲酸1μL/mL，丁酸1μL/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(1)中甲酸在精密度實(shí)驗(yàn)中的RSD為0.82％，在重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中的RSD為0.99％，
在穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中的RSD為0.47％，標(biāo)樣回收率為98.1％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(2)中的SH1011柱的參數(shù)為：8.0mm×300mm，6μm；KC-811柱的參數(shù)為：
8.0mm×300mm，6μm；SH-G柱的參數(shù)為：6.0mm×50mm，10μm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(3)中的食用菌為杏鮑菇XH、金針菇G1或金針菇F29。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(3)中的打碎具體為高低檔間隔打碎50s，直徑0.6cm且菌齡相同的菌塊個(gè)
數(shù)與無菌水容積比為2.5:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用離子排阻色譜柱檢測食用菌培養(yǎng)液中甲酸的方法，其特征
在于：所述步驟(4)中的濾膜孔徑為0.22μm。