本發明涉及一種核酸酶激活型熒光納米探針及其制備方法，該探針包括殼層和核層，其中核層包括藥物和雙鏈DNA探針分子，雙鏈DNA探針分子包括雙鏈DNA、熒光基團和淬滅基團；殼層包裹核層，熒光基團位于雙鏈DNA一條鏈的5’末端或3’末端，淬滅基團位于該鏈的3’末端或5’末端或另一條鏈的5’末端或3’末端。核酸酶激活型熒光納米探針通過將熒光基團和淬滅基團耦合于同一雙鏈DNA分子中，只有在被胞內核酸酶激活的情況下才能發出熒光，因此可以準確的記錄和檢測藥物載體在體內的傳遞和代謝情況，而且可以降低背景熒光對藥物載體分析的干擾。同時，探針制備方法簡單，原料相對便宜，使用有毒有機試劑少，減少了反應步驟，提供了制備效率，便于推廣應用。

1.一種核酸酶激活型熒光納米探針，其特征在于，包括殼層和核層，所述
殼層包裹所述核層，所述核層包括藥物和雙鏈DNA探針分子，所述雙鏈DNA
探針分子包括雙鏈DNA、熒光基團和淬滅基團，所述熒光基團位于雙鏈DNA
一條鏈的5’末端或3’末端，所述淬滅基團位于該鏈的3’末端或5’末端或
另一條鏈的5’末端或3’末端。
2.如權利要求1所述的核酸酶激活型熒光納米探針，其特征在于，所述殼
層為有機聚合物、磷脂或無機材料。
3.如權利要求1所述的核酸酶激活型熒光納米探針，其特征在于，所述熒
光基團為芘、異硫氰酸熒光素、羅丹明、綠色羅丹明、X-羅丹明、多甲藻黃素
葉綠素蛋白、藻紅蛋白、羧基熒光素、花青素系列熒光染料、四甲基羅丹明、
德克薩斯紅、四氯羧基熒光素、亞歷克斯熒光素系列、硝基苯并氧雜惡二唑、
六氯熒光素、萘并熒光素、二苯基蒽系列、香豆素系列或吖啶中的一種。
4.如權利要求1所述的核酸酶激活型熒光納米探針，其特征在于，所述淬
滅基團為黑洞淬滅劑系列、4-(4-二甲基氨基偶氮苯基)苯甲酸或蒙蔽淬滅劑中
的一種。
5.如權利要求1所述的核酸酶激活型熒光納米探針，其特征在于，所述的
雙鏈DNA長度為8-30個堿基對。
6.一種核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征在于，包括如下步
驟：
合成雙鏈DNA探針分子，所述雙鏈DNA探針分子包括雙鏈DNA、熒光基
團和淬滅基團，所述熒光基團位于雙鏈DNA一條鏈的5’末端或3’末端，所
述淬滅基團位于該鏈的3’末端或5’末端或另一條鏈的5’末端或3’末端；
殼層包裹雙鏈DNA探針分子。
7.如權利要求6所述的核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征在
于，所述殼層包裹雙鏈DNA探針分子步驟包括：首先，量取氯仿和甲醇混合備
用；其次，稱取1，2-二油酰基-3-三甲基氨基內烷溶于上述制備的氯仿甲醇混合
液中，得到1，2-二油酰基-3-三甲基氨基內烷的氯仿甲醇溶液，再稱取1，2-二
油酰-sn-甘油-3-磷酸卵磷酯溶于上述制備的氯仿甲醇混合液中，得到1，2-二油
酰-sn-甘油-3-磷酸卵磷酯得氯仿甲醇溶液；再量取該1，2-二油酰基-3-三甲基氨
基內烷的氯仿甲醇溶液和1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸卵磷酯得氯仿甲醇溶液混
合，在氮氣裝置中吹至成膜，干燥過夜后除去過量的氯仿和甲醇；然后加入合
成的雙鏈DNA探針分子，水化，再在超聲儀中超聲，過聚碳酸酯膜，反復擠壓
即可得到脂質體殼層包載的雙鏈DNA探針分子。
8.如權利要求7所述的核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征在
于，所述氯仿和甲醇混合是按照體積比為2∶1混合。
9.如權利要求7所述的核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征在
于，所述1，2-二油酰基-3-三甲基氨基內烷的氯仿甲醇溶液濃度為6.986mg/ml，
所述1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸卵磷酯氯仿甲醇溶液的濃度為7.582mg/ml。
10.如權利要求7所述的核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征
在于，所述1，2-二油酰基-3-三甲基氨基內烷的氯仿甲醇溶液與所述1，2-二油
酰-sn-甘油-3-磷酸卵磷酯氯仿甲醇溶液混合是按照體積比為1∶4混合。
11.如權利要求7所述的核酸酶激活型熒光納米探針的制備方法，其特征
在于，所述聚碳酸酯膜的孔徑為200nm。