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檢測單鏈和/或雙鏈DNA的分子探針及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-11-27
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210006970.3 
  • 技術(專利)名稱 檢測單鏈和/或雙鏈DNA的分子探針及其應用 
  • 項目單位 南京工業大學
  • 發明人 田丹碧,劉會祥,唐雪梅,馬玉潔,梅亞軍,宋榮斌 
  • 行業類別 智慧健康-互聯網+平臺
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫晉濤
  • 發布時間 2021-11-27  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于材料制備技術領域,涉及一種檢測單鏈和/或雙鏈DNA的分子探針及其應用。本發明通過對現有技術中的合成方法進行了優化,并優化合成了[Ru(bpy)2(dppz)],發現其具有單鏈和雙鏈兩種探針的作用。發明人初步認為是通過合成方法的優化造成了其分子的空間構形發生了改變,即通過本發明所述的合成方法得到的異構體與DNA的鍵合方式都存在差異,使得本發明的分子探針具有單鏈探針的作用,發明人將對該作用機理進行進一步的探索研究。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種化學結構式I的分子探針,其特征在于其通過合成路線II所述的方法
    制備而得:
    1)化合物1的合成:將鄰菲啰啉與溴化鉀干燥后加入到充分冷卻的濃硫酸
    中,充分冷卻后再滴加HNO3;將反應體系加熱到40~50℃恒溫2小時,再升溫
    到80~90℃恒溫2小時,再到120℃恒溫1小時,然后降溫到80℃恒溫一夜;
    冷卻到室溫后,中和反應體系至pH=6~7,減壓抽濾后用CH2Cl2萃取至CH2Cl2
    接近無色得到化合物1粗產品;
    2)化合物2的合成:用乙醇溶解化合物1,然后滴加鄰苯二胺的乙醇溶液;
    回流兩小時得到淡黃色絮狀沉淀,減壓抽濾,重結晶后真空干燥得到海綿狀黃色
    固體即化合物2;
    3)化合物3的合成:將N,N’-二甲基甲酰胺加入三氯化釕和2,2’-聯吡啶的混
    合體系,加熱回流4個小時后,蒸發掉將所得溶液的大部分溶劑,剩下的溶液冷
    卻至室溫后,再加入丙酮并保持溫度0℃靜置24個小時,析出棕黑色的固體不
    溶物即化合物3粗產品;
    4)化學結構式I的分子探針的合成:將化合物3與化合物2按照摩爾比為1∶1.1
    的比例加入乙醇中,在氮氣保護下加熱回流直到反應溶液變為紅色透明溶液為
    止,冷卻到室溫;蒸出大部分溶劑后加入水煮沸后,再放到冰水浴中冷卻,析出
    不溶物;經過濾,洗滌,旋蒸,重結晶,得到化學結構式I的探針分子;

    2.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟1)
    的粗產品在甲醇中重結晶,得到黃色固體純品。
    3.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟1)
    對產物pH的調節中和時先用濃NaOH溶液,后用Na2CO3溶液直至無氣泡產生。
    4.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟
    3)將化合物3粗產品減壓抽濾并用蒸餾水洗滌粗產品兩次;再將所得粗產品放
    在水與乙醇為體積比1:1的混合溶液中加熱回流一個小時后過濾,再加入氯化鋰
    充分攪拌;最后蒸發溶液中的乙醇,剩下的水溶液冷卻后再繼續放在冰浴中冷卻;
    靜置24個小時后,溶液中析出黑色晶體;過濾,真空干燥得到化合物3純品。
    5.權利要求1所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于其通過
    合成路線II所述的方法制備而得:
    1)化合物1的合成:將鄰菲啰啉與溴化鉀干燥后加入到充分冷卻的濃硫酸
    中,充分冷卻后再滴加HNO3;將反應體系加熱到40~50℃恒溫2小時,再升溫
    到80~90℃恒溫2小時,再到120℃恒溫1小時,然后降溫到80℃恒溫一夜;
    冷卻到室溫后,中和反應體系至pH=6~7,減壓抽濾后用CH2Cl2萃取至CH2Cl2
    接近無色得到化合物1粗產品;
    2)化合物2的合成:用乙醇溶解化合物1,然后滴加鄰苯二胺的乙醇溶液;
    回流兩小時得到淡黃色絮狀沉淀,減壓抽濾,重結晶后真空干燥得到海綿狀黃色
    固體即化合物2;
    3)化合物3的合成:將N,N’-二甲基甲酰胺加入三氯化釕和2,2’-聯吡啶的混
    合體系,加熱回流4個小時后,蒸發掉將所得溶液的大部分溶劑,剩下的溶液冷
    卻至室溫后,再加入丙酮并保持溫度0℃靜置24個小時,析出棕黑色的固體不
    溶物即化合物3粗產品;
    4)化學結構式I的分子探針的合成:將化合物3與化合物2按照摩爾比為1∶1.1
    的比例加入乙醇中,在氮氣保護下加熱回流直到反應溶液變為紅色透明溶液為
    止,冷卻到室溫;蒸出大部分溶劑后加入水煮沸后,再放到冰水浴中冷卻,析出
    不溶物;經過濾,洗滌,旋蒸,重結晶,得到化學結構式I的探針分子;

    6.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于所
    述的步驟1)的粗產品在甲醇中重結晶,得到黃色固體純品。
    7.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于所
    述的步驟1)對產物pH的調節中和時先用濃NaOH溶液,后用Na2CO3溶液直至無
    氣泡產生。
    8.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于
    所述的步驟3)將化合物3粗產品減壓抽濾并用蒸餾水洗滌粗產品兩次;再將所
    得粗產品放在水與乙醇為體積比1:1的混合溶液中加熱回流一個小時后過濾,再
    加入氯化鋰充分攪拌;最后蒸發溶液中的乙醇,剩下的水溶液冷卻后再繼續放在
    冰浴中冷卻;靜置24個小時后,溶液中析出黑色晶體;過濾,真空干燥得到化
    合物3純品。
    9.權利要求1所述的化學結構式I的分子探針的應用,其特征在于將化學結構
    式為I的分子探針與單鏈和/或雙鏈DNA溶解于HCl-Tris緩沖液中配制成水溶液,
    復合所得到的熒光探針用于單鏈和/或雙鏈DNA的熒光分析。
    10.根據權利要求9所述的應用,其特征在于所述的Tris-HCl為弱酸性或弱堿
    性。
    展開

專利技術附圖

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