1.一種化學結構式I的分子探針,其特征在于其通過合成路線II所述的方法
制備而得:
1)化合物1的合成:將鄰菲啰啉與溴化鉀干燥后加入到充分冷卻的濃硫酸
中,充分冷卻后再滴加HNO
3;將反應體系加熱到40~50℃恒溫2小時,再升溫
到80~90℃恒溫2小時,再到120℃恒溫1小時,然后降溫到80℃恒溫一夜;
冷卻到室溫后,中和反應體系至pH=6~7,減壓抽濾后用CH
2Cl
2萃取至CH
2Cl
2接近無色得到化合物1粗產品;
2)化合物2的合成:用乙醇溶解化合物1,然后滴加鄰苯二胺的乙醇溶液;
回流兩小時得到淡黃色絮狀沉淀,減壓抽濾,重結晶后真空干燥得到海綿狀黃色
固體即化合物2;
3)化合物3的合成:將N,N’-二甲基甲酰胺加入三氯化釕和2,2’-聯吡啶的混
合體系,加熱回流4個小時后,蒸發掉將所得溶液的大部分溶劑,剩下的溶液冷
卻至室溫后,再加入丙酮并保持溫度0℃靜置24個小時,析出棕黑色的固體不
溶物即化合物3粗產品;
4)化學結構式I的分子探針的合成:將化合物3與化合物2按照摩爾比為1∶1.1
的比例加入乙醇中,在氮氣保護下加熱回流直到反應溶液變為紅色透明溶液為
止,冷卻到室溫;蒸出大部分溶劑后加入水煮沸后,再放到冰水浴中冷卻,析出
不溶物;經過濾,洗滌,旋蒸,重結晶,得到化學結構式I的探針分子;
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2.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟1)
的粗產品在甲醇中重結晶,得到黃色固體純品。
3.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟1)
對產物pH的調節中和時先用濃NaOH溶液,后用Na
2CO
3溶液直至無氣泡產生。
4.根據權利要求1所述的化學結構式I的分子探針,其特征在于所述的步驟
3)將化合物3粗產品減壓抽濾并用蒸餾水洗滌粗產品兩次;再將所得粗產品放
在水與乙醇為體積比1:1的混合溶液中加熱回流一個小時后過濾,再加入氯化鋰
充分攪拌;最后蒸發溶液中的乙醇,剩下的水溶液冷卻后再繼續放在冰浴中冷卻;
靜置24個小時后,溶液中析出黑色晶體;過濾,真空干燥得到化合物3純品。
5.權利要求1所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于其通過
合成路線II所述的方法制備而得:
1)化合物1的合成:將鄰菲啰啉與溴化鉀干燥后加入到充分冷卻的濃硫酸
中,充分冷卻后再滴加HNO
3;將反應體系加熱到40~50℃恒溫2小時,再升溫
到80~90℃恒溫2小時,再到120℃恒溫1小時,然后降溫到80℃恒溫一夜;
冷卻到室溫后,中和反應體系至pH=6~7,減壓抽濾后用CH
2Cl
2萃取至CH
2Cl
2接近無色得到化合物1粗產品;
2)化合物2的合成:用乙醇溶解化合物1,然后滴加鄰苯二胺的乙醇溶液;
回流兩小時得到淡黃色絮狀沉淀,減壓抽濾,重結晶后真空干燥得到海綿狀黃色
固體即化合物2;
3)化合物3的合成:將N,N’-二甲基甲酰胺加入三氯化釕和2,2’-聯吡啶的混
合體系,加熱回流4個小時后,蒸發掉將所得溶液的大部分溶劑,剩下的溶液冷
卻至室溫后,再加入丙酮并保持溫度0℃靜置24個小時,析出棕黑色的固體不
溶物即化合物3粗產品;
4)化學結構式I的分子探針的合成:將化合物3與化合物2按照摩爾比為1∶1.1
的比例加入乙醇中,在氮氣保護下加熱回流直到反應溶液變為紅色透明溶液為
止,冷卻到室溫;蒸出大部分溶劑后加入水煮沸后,再放到冰水浴中冷卻,析出
不溶物;經過濾,洗滌,旋蒸,重結晶,得到化學結構式I的探針分子;
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6.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于所
述的步驟1)的粗產品在甲醇中重結晶,得到黃色固體純品。
7.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于所
述的步驟1)對產物pH的調節中和時先用濃NaOH溶液,后用Na
2CO
3溶液直至無
氣泡產生。
8.根據權利要求5所述的化學結構式I的分子探針的制備方法,其特征在于
所述的步驟3)將化合物3粗產品減壓抽濾并用蒸餾水洗滌粗產品兩次;再將所
得粗產品放在水與乙醇為體積比1:1的混合溶液中加熱回流一個小時后過濾,再
加入氯化鋰充分攪拌;最后蒸發溶液中的乙醇,剩下的水溶液冷卻后再繼續放在
冰浴中冷卻;靜置24個小時后,溶液中析出黑色晶體;過濾,真空干燥得到化
合物3純品。
9.權利要求1所述的化學結構式I的分子探針的應用,其特征在于將化學結構
式為I的分子探針與單鏈和/或雙鏈DNA溶解于HCl-Tris緩沖液中配制成水溶液,
復合所得到的熒光探針用于單鏈和/或雙鏈DNA的熒光分析。
10.根據權利要求9所述的應用,其特征在于所述的Tris-HCl為弱酸性或弱堿
性。