本發(fā)明公開一種含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針，其結(jié)構(gòu)式如下所示。本發(fā)明的光控?zé)晒忾_關(guān)探針可用于水溶液中pH?4?8的熒光檢測(cè)，該探針?lè)肿幽軌蚩焖俚倪M(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)部，其對(duì)光響應(yīng)迅速，具有較高的靈敏度，并且具有良好的光可逆性，能夠?qū)€粒體進(jìn)行光活化定位檢測(cè)，另外，該探針還具有較好的化學(xué)穩(wěn)定性，較好的溶解性和生物兼容性，不受其他常見的金屬離子等物種的干擾。

1.一種含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針，其特征在于，所述熒光探針為Rh-
Gly熒光探針，其結(jié)構(gòu)通式如(Ⅰ)所示:

其中，
R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；
或R₁＝R₄＝H，R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝-CH₃；
或R₁＝R₂＝-CH₃，R₃＝R₄＝H；
或R₁＝R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝R₄＝H；
或R₁和R₄一起形成-(CH₂)₃-，R₂和R₃一起形成-(CH₂)₃-。
2.權(quán)利要求1所述的一種含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針的制備方法，其
特征在于，包括如下步驟：
(1)羅丹明甘氨酸甲酯的制備
稱取羅丹明類化合物于圓底燒瓶中，加入1，2-二氯乙烷至完全覆蓋燒瓶底部，加入三
氯氧磷，加熱反應(yīng)3-5小時(shí)后，冷卻至室溫，加入甘氨酸甲酯的乙腈溶液，再向圓底燒瓶中逐
滴滴入三乙胺，室溫?cái)嚢?2-24h得反應(yīng)液A；將反應(yīng)液A用二氯甲烷萃取，取下層液，加入無(wú)
水硫酸鎂干燥，過(guò)柱提純，得到白色固體；
(2)羅丹明甘氨酸(Rh-Gly)的制備
將白色固體溶于甲醇和過(guò)量的氫氧化鈉溶液中，加熱回流5-8小時(shí)后得反應(yīng)液B，反應(yīng)
液B蒸干后，經(jīng)柱層析提純得到Rh-Gly熒光探針。
3.如權(quán)利要求2所述的含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針的制備方法，其特
征在于，羅丹明類化合物與三氯氧磷的摩爾比為1:(3-6)。
4.如權(quán)利要求2所述的含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針的制備方法，其特
征在于，所述羅丹明類化合物為羅丹明B，羅丹明6G，四甲基羅丹明TMR，羅丹明110或羅丹明
101。
5.如權(quán)利要求2所述的含有甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針的制備方法，其特
征在于，步驟1)中采用80-100℃的油浴加熱反應(yīng)3-5小時(shí)。
6.一種如權(quán)利要求1所述的含甘氨酸結(jié)構(gòu)的羅丹明光控?zé)晒忾_關(guān)探針，能夠準(zhǔn)確測(cè)定
溶液中的pH，其pKa為5.8，pH檢測(cè)范圍為4.0-8.0。