本發明涉及一種比色比率型酸堿熒光探針及其制備方法和應用。該比色比率型酸堿熒光探針具有如式1、式2或式3所示的半花菁和對羥基苯乙醛的綴合結構。本發明的比色比率型酸堿熒光探針，具有良好的水溶性，在pH為6.0～8.0范圍內裸眼觀察，pH小于7.0時為黃色，pH越小黃色越深，pH大于7.0時為紅色，pH越大顏色越深；熒光檢測試驗表明，采用455nm波長激發，在pH為6.6～8.0范圍內，pH值變化與熒光強度比值I530nm/I557nm的變化具有良好的線性關系，表明在酸堿響應下具有比色比率特性；該比色比率型酸堿熒光探針在腫瘤細胞的自噬過程檢測中具有良好應用。

1.一種比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：所述比色比率型酸堿熒光探針具有如式1、式2或式3所示的結構， 2.如權利要求1所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：所述比色比率型酸堿熒光探針的制備方法包括：在保護氣氛下，對羥基苯乙醛和式4所示的化合物在溶劑中回流反應，即得； 3.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：對羥基苯乙醛的制備包括以下步驟：將對羥基苯乙醇和三乙胺溶于溶劑中，加入催化劑進行反應，即得。4.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：式4所示的化合物的制備包括以下步驟：在保護氣氛下，2,3,3-三甲基-3H-吲哚和碘乙烷在70～80℃反應，即得。5.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：所述溶劑為無水乙醇。6.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：對羥基苯乙醛和式4所示的化合物的摩爾比為1：1～2。7.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：回流反應時加入哌啶作為催化劑。8.如權利要求2所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：每1mmol對羥基苯乙醛對應加入2～3滴哌啶。9.如權利要求2～8任一項所述的比色比率型酸堿熒光探針在檢測腫瘤細胞自噬過程中的應用，其特征在于：回流反應的時間為4～6h。