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一種TaqMan探針實時熒光RT-PCR檢測黃病毒的非診斷性方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-05
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210007674.5 
  • 技術(專利)名稱 一種TaqMan探針實時熒光RT-PCR檢測黃病毒的非診斷性方法 
  • 項目單位 中國檢驗檢疫科學研究院
  • 發明人 孫肖紅,郭金金,燕清麗,方艷輝,楊鵬飛 
  • 行業類別 智慧健康-互聯網+平臺
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 秦詠蕊
  • 發布時間 2022-01-05  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種TaqMan探針實時熒光RT-PCR檢測黃病毒的非診斷性方法,該非診斷性方法包括一對引物和探針對待檢樣本進行實時定量檢測,旨在針對黃病毒屬成員多、檢測繁瑣,給新發蟲媒病毒監測檢測帶來不便的問題。該非診斷性方法克服了傳統和現代方法中存在的不足,該引物和探針具有高度特異性、重復性好、靈敏度高、可進行多重定量的特點。
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  • 02

    說明書

    1.一種TaqMan探針實時熒光RT-PCR檢測黃病毒的非診斷性方法,其特征在于,該非診斷性方法包括:設計了一對引物和探針對待檢樣本進行實時定量檢測,引物和探針序列為:正向引物序列Fla-F??????5’-CAACATGATGGGRAARAG-3’;反向引物序列Fla-R??????5’-CHAGRGCTTCRAACTCHAG-3’;熒光探針序列Fla-P???????5’-FAM-CTCCVAGCCACATGTACCATAT-BHQ1-3’。2.?如權利要求1所述的非診斷性方法,其特征在于,所述該非診斷性方法包括步驟:1)樣本用裂解液和RNA抽提液處理,提取病毒RNA;2)實時熒光RT-PCR反應,配制一定組分濃度的25μLPCR反應體系,混勻后短暫離心分裝到PCR管中;3)將待測樣品加入到反應體系中,進行擴增;4)收集熒光信號,檢測Ct值。3.如權利要求2所述的非診斷性方法,其特征在于,所述實時熒光RT-PCR反應的體系組分及其體積如下:????????組分???????????????????????????????體積μL2×RT-PCR?Buffer??????????????12.510μM??Fla-F????????????????????????0.510μM??Fla-R????????????????????????0.510μM??Fla-P?????????????????????????0.525×RT-PCR?Enzyme?Mix???????1病毒RNA??????????????????????????????5雙蒸水??????????????????????????????????5總體積?????????????????????????????????25擴增條件:采用本領域的標準擴增條件。
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