1.一種TaqMan探針實時熒光RT-PCR檢測黃病毒的非診斷性方法,其特征在于,該非診斷性方法包括:設計了一對引物和探針對待檢樣本進行實時定量檢測,引物和探針序列為:正向引物序列Fla-F??????5’-CAACATGATGGGRAARAG-3’;反向引物序列Fla-R??????5’-CHAGRGCTTCRAACTCHAG-3’;熒光探針序列Fla-P???????5’-FAM-CTCCVAGCCACATGTACCATAT-BHQ1-3’。2.?如權利要求1所述的非診斷性方法,其特征在于,所述該非診斷性方法包括步驟:1)樣本用裂解液和RNA抽提液處理,提取病毒RNA;2)實時熒光RT-PCR反應,配制一定組分濃度的25μLPCR反應體系,混勻后短暫離心分裝到PCR管中;3)將待測樣品加入到反應體系中,進行擴增;4)收集熒光信號,檢測Ct值。3.如權利要求2所述的非診斷性方法,其特征在于,所述實時熒光RT-PCR反應的體系組分及其體積如下:????????組分???????????????????????????????體積μL2×RT-PCR?Buffer??????????????12.510μM??Fla-F????????????????????????0.510μM??Fla-R????????????????????????0.510μM??Fla-P?????????????????????????0.525×RT-PCR?Enzyme?Mix???????1病毒RNA??????????????????????????????5雙蒸水??????????????????????????????????5總體積?????????????????????????????????25擴增條件:采用本領域的標準擴增條件。
展開