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一種線粒體靶向的雙信號turn-on的甲醛熒光納米探針及其制備與應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-03
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710650829.X 
  • 技術(專利)名稱 一種線粒體靶向的雙信號turn-on的甲醛熒光納米探針及其制備與應用 
  • 項目單位 浙江工業大學
  • 發明人 朱勍,謝振達,方紅梨,朱伸,趙成艷 
  • 行業類別 智慧健康-其他
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 褚雅嵐
  • 發布時間 2022-01-03  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種線粒體靶向的雙信號turn?on的甲醛熒光納米探針的制備方法及應用,是一種基于熒光能量共振轉移以及自組裝共同作用下的甲醛熒光納米探針。該納米探針在水中幾乎沒有熒光,與甲醛反應后得到兩個自由的熒光物質,從而實現雙turn?on的效果,從而提高了檢測結果的準確性。納米探針對甲醛具有很好的專一性。共聚焦熒光顯微鏡成像實驗很好地證明了納米探針能夠滲透細胞膜進入細胞的線粒體中,且能夠在細胞中檢測甲醛濃度的變化,為研究甲醛在細胞線粒體的代謝機制提供了新的工具,在生物領域具有很好的前景。
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  • 02

    說明書

    1.一種熒光納米探針,其特征在于,所述熒光納米探針由化合物(I)在水中自組裝而制得:所述化合物(I)結構式為: 2.一種如權利要求1所述的熒光納米探針的制備方法,其特征在于所述制備方法為:對羥基苯甲醛與3-溴丙炔在堿性條件下發生親核取代反應,生成化合物(II);化合物(II)與氨甲醇溶液生成席夫堿化合物,隨后與丙烯基硼酸鄰二叔醇酯發生取代反應生成化合物(III);化合物(III)與化合物(IV)在酸性條件下,生成席夫堿中間產物,其碳氮雙鍵被還原劑三乙酰氧基硼氫化鈉還原生成化合物(V);化合物(VI)與3-疊氮丙胺發生酰胺反應生成化合物(VII);最后,將化合物(V)與化合物(VII)在一價銅的催化下,生成化合物(I);再將化合物(I)溶于DMSO作為母液,用超純水或PBS緩沖液或細胞培養液稀釋,超聲數分鐘,然后劇烈震蕩,化合物(I)自組裝得到所述熒光納米探針; 3.如權利要求2所述的熒光納米探針的制備方法,其特征在于所述制備方法具體為:(1)對羥基苯甲醛與3-溴丙炔按物質的量比1:2在堿性條件下反應,經后處理A制備得化合物(II);反應溫度為60-70℃,反應時間為3小時,反應溶劑為丙酮;(2)化合物(II)與氨甲醇溶液、丙烯基硼酸鄰二叔醇酯在0℃下混合后轉至25-35℃反應,經后處理B制備得化合物(III);反應時間為12小時,反應溶劑為甲醇;所述化合物(II)與氨甲醇溶液中的氨、丙烯基硼酸鄰二叔醇酯的物質的量比為1:10:1.5;(3)化合物(IV)與化合物(III)、三乙酰氧基硼氫化鈉按物質的量比1:1.2:4在酸性條件下0℃混合后轉至20-30℃反應,經后處理C制備得化合物(V);反應時間為12小時,反應溶劑為四氫呋喃;(4)化合物(VI)與3-疊氮丙胺按物質的量比1:1.2反應,經后處理D制備得化合物(VII);反應溫度為室溫,反應時間為10小時,反應溶劑為二氯甲烷;(5)將化合物(V)與化合物(VII)按物質的量比1:1在一價銅催化下反應,蒸干溶劑,粗產物利用高效液相色譜純化得到化合物(I);反應溫度為室溫,反應時間為6小時,反應溶劑為四氫呋喃和水;(6)將化合物(I)溶于DMSO配制成濃度為0.1~2mM的探針母液,用超純水或PBS緩沖液或DMEM培養基稀釋成原來母液體積的99倍,超聲數分鐘,然后劇烈震蕩,化合物(I)自組裝得到所述熒光納米探針。4.如權利要求3所述的熒光納米探針的制備方法,其特征在于:步驟(1)中所述堿性條件采用碳酸鉀實現。5.如權利要求3所述的熒光納米探針的制備方法,其特征在于:步驟(3)中所述酸性條件采用乙酸實現。6.如權利要求3所述的熒光納米探針的制備方法,其特征在于:所述后處理A為:反應液減壓旋蒸除去溶劑后加入水,乙酸乙酯萃取,合并有機相,取有機相用水以及飽和食鹽水洗滌數次,無水硫酸鈉干燥,過濾,旋干溶劑,經柱層析分離后得到目標產物,洗脫劑為體積比1:10的乙酸乙酯和石油醚;所述后處理B為:反應液減壓旋蒸除去溶劑,粗產物進行層析柱分離后得到目標產物,洗脫劑為體積比40:1的二氯甲烷和甲醇;所述后處理C為:反應液減壓旋蒸除去溶劑,粗產物進行層析柱分離后得到目標產物,洗脫劑為體積比20:1的二氯甲烷和甲醇;所述后處理D為:反應液采用薄層層析進行分離,展開劑為體積比20:1的二氯甲烷和甲醇,得到目標化合物。7.一種權利要求1所述的熒光納米探針在檢測甲醛濃度中的應用。8.如權利要求7所述的應用,其特征在于:所述甲醛以水溶液形式存在,濃度為0~5mmol/L。9.如權利要求8所述的應用,其特征在于:所述甲醛為細胞內甲醛,濃度為0~1mmol/L。10.如權利要求9所述的應用,其特征在于:所述細胞為人乳腺癌細胞MCF-7。
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