本發(fā)明公開了一種利用熒光蛋白作為熒光探針測量電離輻射下細(xì)胞氧化脅迫損傷的方法，利用熒光蛋白選擇定位表達(dá)在對電離輻射敏感的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)上，對電離輻射產(chǎn)生自由基含量進(jìn)行定量化的測量，從而通過直接觀測蛋白熒光強(qiáng)度變化推測電離輻射對細(xì)胞具體部位的損傷，本發(fā)明發(fā)射的熒光易于檢測，靈敏度高，熒光性質(zhì)穩(wěn)定，在較大的pH范圍內(nèi)也能正常發(fā)光，對高溫、去垢劑、鹽、有機(jī)溶劑和大多數(shù)普通酶具有較強(qiáng)抗性，對細(xì)胞無毒害，不受假陽性干擾，構(gòu)建載體方便，表達(dá)沒有種屬、組織和位置特異性。

1.一種利用熒光蛋白作為細(xì)胞內(nèi)源熒光探針探測細(xì)胞在電離輻射下受到氧化脅
迫導(dǎo)致電離輻射損傷的方法，包括下列步驟：
(1)首先，利用一般分子生物學(xué)融合蛋白表達(dá)的方法或商業(yè)化的試劑對細(xì)胞中
的電離輻射產(chǎn)生氧化脅迫敏感的線粒體、細(xì)胞膜進(jìn)行熒光蛋白GFP靶向定位標(biāo)
記；
(2)其次，對特異性表達(dá)熒光蛋白靶向標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行電離輻照處理；
(3)然后，利用激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光光譜儀，通過對細(xì)胞線
粒體、細(xì)胞膜表達(dá)的熒光蛋白的熒光強(qiáng)度進(jìn)行實時測量、定量分析，由其熒光蛋
白在電離輻射條件下的熒光強(qiáng)度減弱程度而定量評估電離輻射引起細(xì)胞的氧化
脅迫損傷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用熒光蛋白作為細(xì)胞內(nèi)源熒光探針探測細(xì)胞在電離
輻射下受到氧化脅迫導(dǎo)致電離輻射損傷的方法，其特征在于：所述的熒光蛋白選
擇定位表達(dá)在對電離輻射敏感的線粒體、細(xì)胞膜上，從而通過直接觀測蛋白熒光
強(qiáng)度變化推測電離輻射通過氧化性自由基對細(xì)胞及具體部位的輻射損傷。