本發(fā)明公開了一種從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法和試劑，所述方法包括：(a)使用探針對含有待檢測位點或待檢測區(qū)域的目標DNA的接頭連接產(chǎn)物進行探針預富集，其中所述探針是雙鏈寡核苷酸，所述接頭連接產(chǎn)物的兩端的接頭均包括通用引物的結合位點；(b)使用針對所述待檢測位點或待檢測區(qū)域的上游特異性引物和下游特異性引物，以及兩端的通用引物對探針預富集產(chǎn)物進行特異性富集，再對特異性富集產(chǎn)物進行通用引物擴增。本方法解決了現(xiàn)有檢測技術針對含有大量外源DNA污染的復雜樣本檢測靈敏度低的技術問題。

1.一種從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所述方法包括：
（a）使用探針對含有待檢測位點或待檢測區(qū)域的目標DNA的接頭連接產(chǎn)物進行探針預
富集，其中所述探針是通過PCR擴增得到的一對或多對覆蓋待檢測位點或待檢測區(qū)域的雙
鏈寡核苷酸，所述接頭連接產(chǎn)物的兩端的接頭均包括通用引物的結合位點；
（b）使用針對所述待檢測位點或待檢測區(qū)域的上游特異性引物和下游特異性引物，以
及兩端的通用引物對探針預富集產(chǎn)物進行特異性富集，再對特異性富集產(chǎn)物進行通用引物
擴增；以及
（c）對所述步驟（b）的擴增產(chǎn)物進行測序，以檢測所述待檢測位點或待檢測區(qū)域。
2.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所
述探針帶有親和標記。
3.根據(jù)權利要求2所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所
述親和標記是位于所述探針兩條鏈的5’端的生物素標記。
4.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所
述步驟（b）使用多條所述上游特異性引物組成的引物組和多條所述下游特異性引物組成的
引物組。
5.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所
述探針長度為150-200bp。
6.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，每
一個所述上游特異性引物和下游特異性引物距離所述待檢測位點或待檢測區(qū)域的距離為
1-20個堿基。
7.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，每
一個所述上游特異性引物和下游特異性引物距離所述待檢測位點或待檢測區(qū)域的距離為
1-5個堿基。
8.根據(jù)權利要求1所述的從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的方法，其特征在于，所
述待檢測位點或待檢測區(qū)域包括點突變、插入、缺失和基因融合中的至少一種。
9.一種從多種混合DNA中超靈敏檢測痕量DNA的試劑，其特征在于，所述試劑包括：
（a）探針，所述探針是通過PCR擴增得到的一對或多對覆蓋待檢測位點或待檢測區(qū)域的
雙鏈寡核苷酸，用于對含有待檢測位點或待檢測區(qū)域的目標DNA的接頭連接產(chǎn)物進行探針
預富集，其中，所述接頭連接產(chǎn)物的兩端的接頭均包括通用引物的結合位點；
（b）上游特異性引物和下游特異性引物，以及通用引物，用于對探針預富集產(chǎn)物進行特
異性富集，以及對特異性富集產(chǎn)物進行通用引物擴增。