本發(fā)明公開了一種番茄黑環(huán)病毒(TBRV)的檢測方法，本發(fā)明針對TBRV不同分離物外殼蛋白基因的保守序列設計特異性引物和MGB探針，利用TBRV的不同分離物，建立了TBRV的反轉錄PCR(RT-PCR)和實時熒光PCR的檢測方法。本發(fā)明利用引物和探針可以特異性區(qū)分番茄黑環(huán)病毒，且大大縮短了檢測時間，檢測的靈敏度也大大提高。

1.一種番茄黑環(huán)病毒的檢測方法，其特征在于，采用實時熒光PCR檢測方法，包括如下步驟：(1)設計引物和探針；步驟(1)中所述設計的引物為：TBRV-CP?133-F：5’-TCGTTTCTTGCAGTTTGCGTAT-3’；TBRV-CP?133-R：5’-GTGGCAAAGAAGGGAGACTGTATT-3’；步驟(1)中所述設計的探針為：TBRV-CP-MGB-FAM：5’(FAM)-CACAGATACCACATGTGGA-3’(MGB)；(2)番茄黑環(huán)病毒RNA提取和cDNA第一鏈合成；(3)采用設計的引物和探針進行PCR擴增，檢測結果。2.如權利要求1所述的番茄黑環(huán)病毒的檢測方法，其特征在于，步驟(3)中實時熒光PCR的反應條件為：預變性95℃10min后，進行95℃15s，60℃1min的40個循環(huán)。