1.一種人支氣管上皮細胞株,其特征在于,命名為人支氣管上皮細胞株HBE-TT,保藏在
中國典型培養物保藏中心,保藏編號為CCTCC NO:C201560;所述人支氣管上皮細胞株HBE-
TT使用的質粒包括pBabe-hyg-hTERT和pBABE-neo-largeTcDNA;所述人支氣管上皮細胞株
的制備方法包括如下步驟:
1)原代支氣管上皮細胞的獲取和培養;
2)細胞永生化,包括接種并轉染包裝細胞、接種靶細胞、收集病毒上清液并感染靶細胞
和陽性細胞篩選的步驟;
所述接種并轉染包裝細胞的步驟如下:
以1×10
6/皿的密度接種293T細胞于10cm培養皿,24h后將pBABE-neo空載體、pBABE-
neo-largeTcDNA、pBABE-hyg-hTERT和pCL-ampho四種質粒的濃度統一調整為1μg/μL,然后
用FuGENE-6進行轉染,按如下比例配制反應體系:
2.根據權利要求1所述的人支氣管上皮細胞株,其特征在于,所述人支氣管上皮細胞株
HBE-TT在鏡下觀察其形態呈多邊形。
3.根據權利要求1所述的人支氣管上皮細胞株,其特征在于,所述人支氣管上皮細胞株
HBE-TT的細胞倍增時間為44.5±2.7h。
4.根據權利要求1所述的人支氣管上皮細胞株,其特征在于,所述人支氣管上皮細胞株
HBE-TT的蛋白表達特征為:LT蛋白陽性表達,角蛋白陽性表達,肌動蛋白陰性表達。
5.根據權利要求1所述的人支氣管上皮細胞株,其特征在于,所述人支氣管上皮細胞株
HBE-TT未遭受雜細胞交叉污染。
6.根據權利要求1所述的人支氣管上皮細胞株,其特征在于,所述人支氣管上皮細胞株
HBE-TT未遭受病原微生物污染。
7.如權利要求1~6任一項所述的人支氣管上皮細胞株HBE-TT的子代細胞。