1.一種云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于包含如下步驟：
(1)云芝(Coriolus versicolor)液體深層發酵后，分離得到云芝菌絲體和發酵液，其
中，云芝菌絲體干燥粉碎并過篩后，脫脂，干燥，得到脫脂后的菌絲體；發酵液超濾去除小分
子物質，得到云芝超濾液；所述的云芝液體深層發酵的培養基配方為：葡萄糖50g，NH4NO3
2g，KH2PO4 2g，MgSO4·7H2O 1g，維生素B1 0.05g，水1000mL，pH 6.5；
(2)熱水浸提脫脂后的菌絲體，得到含云芝胞內多糖的浸提液；
(3)將步驟(1)得到的云芝超濾液和步驟(2)得到的浸提液分別濃縮，得到超濾濃縮液
和浸提濃縮液；
(4)將步驟(3)制備得到的超濾濃縮液和浸提濃縮液分別采用胰蛋白酶和Sevage法去
蛋白，得到去蛋白后的胞外多糖提取液和胞內多糖提取液；
(5)用乙醇分別沉降步驟(4)得到的胞外多糖提取液和胞內多糖提取液中的多糖，然后
離心分離得到沉淀，脫色透析干燥后，分別制得云芝胞內提取物和云芝胞外多糖提取物；
步驟(4)中所述的胰蛋白酶和Sevage法，包含如下步驟：
①將步驟(3)制備得到的濃縮液分別調pH至8.0；然后將胰蛋白酶加入濃縮液中充分混
合并37℃振蕩30～60min，再水浴滅酶10～15min，冷卻至室溫；
②去蛋白后的濃縮液加入0.2倍體積的氯仿正丁醇混合液，劇烈振蕩30～40min；然后
離心，棄取蛋白層及有機溶液，回收上清液；
③重復步驟②2～3次，得到去蛋白后的多糖提取液。
2.根據權利要求1所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的脫脂方法為：菌絲體粉末與石油醚按體積比為1:2混勻，振蕩或攪拌
處理2～3d，脫去菌絲體中的脂質，離心留沉淀；重復脫脂1～2次。
3.根據權利要求1所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的超濾條件為進膜壓力為10bar，通量3～5L/min，物料溫度22℃。
4.根據權利要求1所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的熱水浸提的條件為：料液比為1:30，提取時間為2～3h，提取溫度為90
℃，提取次數為1～3次。
5.根據權利要求1所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(5)中所述的脫色透析干燥的方法為：用水溶解沉淀并調節多糖溶液pH至8.0；然
后滴加質量分數為30％的H2O2溶液，于50～55℃水浴保溫2～3h，對其進行氧化脫色處理；然
后將多糖溶液裝入截留分子量為8000～15000Da的透析袋中透析2～3d，每8～10h更換一次
水；對透析完成后的溶液進行濃縮，并真空冷凍干燥，獲得云芝多糖提取物。
6.根據權利要求1所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的云芝(Coriolus versicolor)液體深層發酵培養的方法，包含如下步
驟：
(Ⅰ)將云芝斜面母種活化培養后轉接至斜面固體培養基中，24～27℃培養10～15d，直
至菌絲鋪滿斜面為止，得到云芝斜面菌種；
(Ⅱ)從步驟(Ⅰ)制備得到的云芝斜面菌種上挑取4～6菌塊，接種至200mL的液體發酵培
養基中，室溫靜置24h，待菌塊傷口處愈合后，在150rpm，27的條件下振蕩培養6d，制得一級
種子液；
(Ⅲ)將步驟(Ⅱ)制備得到的一級種子液轉入50L種子罐培養二級種子液，接種量為
7％，培養溫度為27℃，轉速為150rpm，罐壓為0.05～0.07MPa，通氣量1.5m3/h，培養3d后轉
入500L發酵罐培養，初始培養條件溫度，轉速及罐壓與種子罐相同，通氣量為12m3/h，培養3
～5d。
7.根據權利要求6所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(Ⅰ)所述的斜面固體培養基的配方為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨1g，(NH4)
2SO4 2g，MgSO4·7H2O 1g，KH2PO4 1g，瓊脂20g，加蒸餾水定容至1000mL，pH調至6.5。
8.根據權利要求6所述的云芝多糖提取物的制備方法，其特征在于：
步驟(Ⅱ)和(Ⅲ)中用于一級種子液和二級種子液培養以及發酵培養的培養基配方為：
步驟(1)中所述的云芝液體深層發酵的培養基配方為：葡萄糖50g，NH4NO3 2g，KH2PO4 2g，
MgSO4·7H2O 1g，維生素B1 0.05g，水1000mL，pH 6.5。
9.一種云芝多糖提取物，其特征在于根據權利要求1～8任一項所述的制備方法制備得
到。
10.權利要求9所述的云芝多糖提取物在制備降血脂、抗動脈粥樣硬化藥物或保健食品
中的應用。
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