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一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法及應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-12-13
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510242493.4 
  • 技術(專利)名稱 一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法及應用 
  • 項目單位 武昌理工學院
  • 發明人 劉陽,阮金蘭,周涵黎,李麗,馬明蘭,譚珺雋,張琳 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王毅霆
  • 發布時間 2022-12-13  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于中藥提取物的制備技術領域,具體公開了一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法及應用。本發明制備方法的具體步驟包括:紫皮洋蔥用酸溶醇沉法分離提取、冷凍干燥后獲得洋蔥蛋白凍干粉,依次加入酸性蛋白酶、胃蛋白酶酶解,離心取上清液,稀釋后用凝膠層析分離,收集分子量3000?1000 D的組分,冷凍干燥即得洋蔥活性多肽凍干粉。本發明采用復合酶酶解和凝膠色譜方法制備洋蔥活性多肽,具有條件溫和、安全性高、成本低廉、產物易分離、綠色環保等優點;所制備的洋蔥活性多肽具有明顯的口服降糖、降脂作用,可以用于制備預防或治療糖尿病、高血脂的藥物或保健食品及食品。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種洋蔥活性多肽提取物的制備方法,步驟如下:
    (1)取洋蔥,切丁、勻漿,加入洋蔥重量1-3倍的0.2 mol/L pH 5.0-7.0的磷酸鹽緩沖液
    浸泡,置于4℃冰箱12小時后,冷凍離心,上層即為洋蔥蛋白粗提液;
    (2)向步驟(1)所得洋蔥蛋白粗提液中緩慢加入其1/3-1倍體積的95 v/v %乙醇,然后
    用0.6 w/w %NaOH溶液調節pH 至8.0,冰浴中靜置過夜后,冷凍離心,收集沉淀,冷凍干燥即
    得洋蔥蛋白凍干粉;
    (3)向步驟(2)所得洋蔥蛋白凍干粉中加入6-8倍重量的蒸餾水稀釋,然后用0.1 mol/L
    HCl調節pH至3.5;
    (4)向步驟(3)所得溶液中按酶底比1:(8-12)加入酸性蛋白酶,在55℃下酶解1-3小時,
    滅酶,冷卻至室溫;
    步驟(4)中所述酶底比為酸性蛋白酶與步驟(2)所得洋蔥蛋白凍干粉的質量比;
    所述酸性蛋白酶的活力為50000 u/g;
    (5)用0.1 mol/L HCl調節步驟(4)所得溶液pH至1.5,按酶底比1:(50-70)加入胃蛋白
    酶,在37℃下酶解1-3小時,滅酶,冷卻至室溫,4℃、20000轉/分鐘離心30 分鐘,收集上清
    液;
    步驟(5)中所述酶底比為胃蛋白酶與步驟(2)所得洋蔥蛋白凍干粉的質量比;
    所述胃蛋白酶的活力為3000 u/mg;
    (6)將步驟(5)收集的上清液用蒸餾水稀釋至為含多肽3-7 mg/mL的溶液,用葡聚糖凝
    膠層析分離,收集分子量1000-3000 D的組分,冷凍干燥,即得到洋蔥活性多肽提取物凍干
    粉。
    2.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)中,所述洋蔥為紫皮洋蔥;所
    述磷酸鹽緩沖液pH為6.0;所述磷酸鹽緩沖液用量為洋蔥重量的2倍。
    3.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(2)中,所述95 v/v %乙醇用量為
    洋蔥蛋白粗提液體積的0.5倍。
    4.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(3)中,所述蒸餾水用量為洋蔥蛋
    白凍干粉重量的7倍。
    5.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(4)中,所述酶底比為1:10;所述
    酶解時間為2小時;所述滅酶條件為95℃、15分鐘。
    6.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(5)中,所述酶底比為1:60;所述
    酶解時間為2小時;所述滅酶條件為95℃、15分鐘。
    7.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于:步驟(6)中,將步驟(5)收集的上清液
    用蒸餾水稀釋至為含多肽5 mg/mL的溶液,葡聚糖凝膠層析的分離條件為:凝膠色譜柱為
    Superdex Peptide 10/300GL,流動相為0.2 mol/L的pH 7.4磷酸鹽緩沖液,流速0.5 mL/
    min。
    8.根據權利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有口
    服降糖和/或降脂作用的藥物中的應用。
    9.根據權利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有口
    服降糖和/或降脂作用的食品中的應用。
    10.根據權利要求1-7中任一所述的制備方法制得的洋蔥活性多肽提取物在制備具有
    口服降糖和/或降脂作用的保健食品中的應用。
    展開

專利技術附圖

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