亞洲玉米螟OfAK基因及其編碼蛋白和OfAK基因RNAi干擾工程菌株構建的方法，它涉及玉米螟OfAK基因片段及其RNAi干擾載體，本發明提供亞洲玉米螟精氨酸激酶部分cDNA序列及其RNAi干擾載體工程菌株構建，目的為降低亞洲玉米螟對幾種殺蟲劑的耐受性，增強玉米自身防御反應對亞洲玉米螟的作用，減少田間殺蟲劑使用。本發明亞洲玉米螟OfAK基因序列如序列表Seq ID No：1所示。亞洲玉米螟OfAK基因編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示。本發明OfAK基因RNAi干擾菌株，降低亞洲玉米螟對幾種殺蟲劑的耐受性，增強玉米自身防御反應對亞洲玉米螟的作用，滿足綠色農業、安全農業的要求。

1.亞洲玉米螟OfAK基因RNAi干擾工程菌株的應用，其特征在于它用于增強玉米自身防
御反應及高效氯酸菊酯、溴蟲腈和氯蟲腈農藥對亞洲玉米螟的毒殺作用；所述的亞洲玉米
螟OfAK基因的核苷酸序列如序列表Seq ID No：1所示；
亞洲玉米螟OfAK基因RNAi干擾工程菌株構建的方法如下：
一、OfAK基因克隆
以由亞洲玉米螟三齡幼蟲總RNA反轉錄而成的cDNA為PCR模板，采用如下引物：
P1，5’-GTAGATCTATGGTGGACGCCGCAAC-3’；
P2，5’-GGAAGCTTGATCAGTTCAGCGATGCC-3’；
進行PCR擴增，擴增后，純化PCR產物，回收純化PCR產物；
二、OfAK基因干擾工程菌株的構建
使用BgIⅡ和HindⅢ分別酶切步驟一回收純化的PCR產物和L4440載體，對酶切后的PCR
產物和L4440載體進行連接，然后轉入大腸桿菌HT115感受態細胞中，將驗證為陽性的克隆
進行測序，測序成功的菌株，即為亞洲玉米螟OfAK基因RNAi干擾工程菌株；所述的增強玉米
自身防御反應是指增強經茉莉酸甲酯處理后的玉米自身防御反應。
2.根據權利要求1所述的亞洲玉米螟OfAK基因RNAi干擾工程菌株的應用，其特征在于
步驟一中所述的PCR反應條件如下：
PCR反應體系為：

PCR程序如下：94℃預變性10min，94℃變性1min，55.8℃退火1min，72℃延伸30s，共35
個循環，再72℃延伸10min，4℃保存。