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一種豬卵母細胞體外成熟培養液及其制備方法與應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-05
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201911204404.1 
  • 技術(專利)名稱 一種豬卵母細胞體外成熟培養液及其制備方法與應用 
  • 項目單位 東北農業大學
  • 發明人 劉忠華,金君學,孫婧陶,姜超前,王傳玥,張弛 
  • 行業類別 中藥材獲取-非動植物采選
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王志喬
  • 發布時間 2021-12-05  
  • 01

    項目簡介

    一種豬卵母細胞體外成熟培養液及其制備方法與應用,屬于卵母細胞體外成熟培養技術領域。為了解決目前豬卵母細胞體外成熟率和發育率低的問題,本發明提供了一種豬卵母細胞體外成熟培養液及其制備方法與應用。本發明所述的培養液由基礎培養液TCM?199,青霉素,鏈霉素,NaHCO,4?羥乙基哌嗪乙磺酸,聚乙烯醇,丙酮酸鈉,胰島素,半胱氨酸,表皮生長因子,豬卵泡液,孕馬血清促性腺激素,人絨毛膜促性腺激素和單寧酸組成。本發明所述的培養液,可以提高卵母細胞體外成熟質量、卵丘細胞擴散指數、孤雌胚胎囊胚率和囊胚總細胞數、體外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚總細胞數。
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  • 02

    說明書

    1.一種豬卵母細胞體外成熟培養液,其特征在于,所述豬卵母細胞體外成熟培養液含有單寧酸;所述培養液由基礎培養液TCM-199,質量濃度為0.066g/L的青霉素,質量濃度為0.08g/L的鏈霉素,濃度為2mmol/L的NaHCO3,濃度為9.5mmol/L的4-羥乙基哌嗪乙磺酸Hepes,質量濃度為3.5g/L的聚乙烯醇,濃度為0.9mmol/L的丙酮酸鈉,質量濃度為8ng/mL的胰島素,濃度為0.7mmol/L的半胱氨酸,質量濃度為12ng/mL的表皮生長因子,體積濃度為75mL/L的豬卵泡液,濃度為8IU/mL的孕馬血清促性腺激素PMSG,濃度為12IU/mL的人絨毛膜促性腺激素hCG和濃度為50μg/mL的單寧酸組成。2.如權利要求1所述的豬卵母細胞體外成熟培養液的制備方法,其特征在于,具體步驟如下:(1)豬卵泡液的獲取:從豬卵巢的卵泡中抽出液體,對所述液體進行離心,保留上清液,對上清液進行過濾除雜,獲得豬卵泡液;(2)將TCM-199,青霉素,鏈霉素,NaHCO3,Hepes,聚乙烯醇,丙酮酸鈉,胰島素,半胱氨酸,表皮生長因子,PMSG,hCG,單寧酸和步驟(1)所獲得的豬卵泡液混合,獲得培養液粗液;(3)對步驟(2)所獲得的培養液粗液過濾除菌,獲得所述的豬卵母細胞體外成熟培養液。3.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述的豬卵巢溫度是28-35℃。4.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述的離心是4-6℃條件下,12000-14000r/min,離心30-60min。5.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述的過濾除雜是用0.45μm的濾器進行過濾。6.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟(3)所述的過濾除菌是用0.22μm的濾器進行過濾。7.權利要求1所述的豬卵母細胞體外成熟培養液在體外培養豬卵母細胞上的應用。
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