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一種簡化的藍莓果實總DNA提取方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-30
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201711105958.7 
  • 技術(專利)名稱 一種簡化的藍莓果實總DNA提取方法 
  • 項目單位 中國農業科學院果樹研究所
  • 發明人 宋楊,劉鳳之,張紅軍,王海波,劉紅弟 
  • 行業類別 中藥材獲取-動植物采集
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 鄭嘉林
  • 發布時間 2021-12-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于DNA提取方法技術領域,具體涉及一種簡化的藍莓果實總DNA提取方法。包括用氫氧化鈉溶液和有機酸溶液對材料預處理、醛溶液、維生素C和DNA提取液的混合溶液對DNA提取、異丙醇沉淀、乙醇清洗等步驟。本發明的方法提取DNA耗時短、DNA純度高,提取的DNA溶液呈透明顏色,而避免色素和多酚氧化的污染,特別適用于藍莓果實總DNA的提取。
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  • 02

    說明書

    1.一種簡化的藍莓果實總DNA提取方法,其特征在于,包括以下步驟:S1,材料預處理:采集藍莓果實,搗碎,加入0.1mol/l的氫氧化鈉溶液,研磨成漿,65±1℃件下孵育10min,用0.1mol/l有機酸溶液調節pH至6.0-7.0,得到預處理藍莓漿;所述有機酸溶液為甲酸溶液或者乙酸溶液;S2,向預處理藍莓漿中加入0.1mol/l醛溶液、維生素C和DNA提取液的混合溶液,37±1℃條件下水浴20min;離心,收集上清液,所述醛溶液為甲醛溶液或者乙醛溶液;其中,混合溶液中0.1mol/l醛溶液、維生素C和DNA提取液的比例為1ml:0.01-0.05g:20-30ml;預處理藍莓漿與混合溶液的體積比例為1:1-2;S3,向上清液中加入0.6-1倍體積經4℃預冷的異丙醇,混勻,-20℃放置≥30min,離心,棄上清,收集DNA沉淀;S4,用乙醇溶液清洗DNA沉淀,溶解,得到藍莓果實總DNA。2.根據權利要求1所述的簡化的藍莓果實總DNA提取方法,其特征在于,S1中,藍莓果實與氫氧化鈉溶液的比例為1g:5ml。3.根據權利要求1所述的簡化的藍莓果實總DNA提取方法,其特征在于,S2中1L DNA提取液中含有0.1mol Tris-HCl、0.1mol EDTA、1.5mol NaCl、10g CTAB,溶劑為雙蒸水,pH8.0。4.根據權利要求1所述的簡化的藍莓果實總DNA提取方法,其特征在于,S3中,異丙醇的體積用量是上清液體積的0.6倍。5.根據權利要求1所述的簡化的藍莓果實總DNA提取方法,其特征在于,S4中,乙醇溶液的體積濃度為70-80%。
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專利技術附圖

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