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金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-30
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201410614781.3 
  • 技術(shù)(專利)名稱 金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法 
  • 項目單位 福建醫(yī)科大學(xué)
  • 發(fā)明人 陳偉,鄧豪華,何棟,許延瑜,孫世杰 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)療器械-診斷設(shè)備
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 蔣一蜒
  • 發(fā)布時間 2021-09-30  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開一種金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,涉及以N?乙酰?L?半胱氨酸保護(hù)的金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖生成HO,F(xiàn)e催化HO產(chǎn)生羥自由基使金納米簇的熒光發(fā)生猝滅,從而表現(xiàn)出熒光發(fā)射光譜特征的變化,可以用于葡萄糖的檢測。在0.39~27.22μmol/L范圍內(nèi)金納米簇?zé)晒忖缰郸與葡萄糖濃度呈線性關(guān)系,檢測限為0.18μmol/L。本發(fā)明靈敏度高,重現(xiàn)性好,可用于食品、工業(yè)、環(huán)境及生命體系中葡萄糖的測定。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄
    糖生成H2O2,F(xiàn)e2+催化H2O2產(chǎn)生羥自由基使金納米簇的熒光發(fā)生猝滅,從而表現(xiàn)出熒光發(fā)射
    光譜特征的變化,能用于葡萄糖的檢測;所使用的金納米簇采用N-乙酰-L-半胱氨酸還原氯
    金酸的方法制備:將濃度為0.02~0.18 mol/L 的N-乙酰-L-半胱氨酸溶液和濃度為0.1~0.8
    mol/L的氫氧化鈉溶液加入到濃度為0.01~0.1 g/L的氯金酸溶液中,混勻,置于20~70℃水
    浴恒溫反應(yīng)2.5小時,反應(yīng)結(jié)束后用截留分子量為3500的透析袋對反應(yīng)液進(jìn)行透析純化處
    理,得到N-乙酰-L-半胱氨酸保護(hù)的金納米團(tuán)簇?zé)晒獠牧纤芤骸?br/>2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是所使用的
    金納米簇優(yōu)選采用N-乙酰-L-半胱氨酸還原氯金酸的方法制備:將濃度為0.08 mol/L 的N-
    乙酰-L-半胱氨酸溶液和濃度為0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液加入到濃度為0.02 g/L的氯金
    酸溶液中,混勻,置于37℃水浴恒溫反應(yīng)2.5小時,反應(yīng)結(jié)束后用截留分子量為3500的透析
    袋對反應(yīng)液進(jìn)行透析純化處理,得到N-乙酰-L-半胱氨酸保護(hù)的金納米團(tuán)簇?zé)晒獠牧纤?br/>液。
    3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是利用N-乙
    酰-L-半胱氨酸保護(hù)的金納米簇在650 nm處的發(fā)射光強(qiáng)度值(F650)以判斷葡萄糖含量,所使
    用的激發(fā)波長為355 nm。
    4.一種金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,包括如下步驟:1)將含不同濃度葡萄
    糖的溶液,所述葡萄糖溶液中含有濃度為20 mmol/L、pH=7.4的HEPES,加入葡萄糖氧化酶溶
    液中,然后置于25℃反應(yīng)5~50分鐘;2)將含有濃度為40 mmol/L硫酸的Fe2+溶液與金納米團(tuán)
    簇溶液依次加入步驟1)的反應(yīng)液中,搖勻后置于25℃水浴鍋反應(yīng)1~15分鐘,測定熒光強(qiáng)度
    值F650,隨著葡萄糖濃度的不斷增大,F(xiàn)650逐漸減小,在0.39~27.22 μmol/L范圍內(nèi)熒光猝滅
    值ΔF650與葡萄糖濃度呈線性關(guān)系,檢測限為0.18 μmol/L。
    5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是步驟1)所
    使用的葡萄糖氧化酶的濃度為0.1 mg/mL,反應(yīng)時間為30分鐘;步驟2)所使用Fe2+溶液的終
    濃度為100 μmol/L,反應(yīng)時間為10分鐘。
    6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的金納米簇為熒光探針的葡萄糖測定方法,其特征是葡萄糖
    溶液,葡萄糖氧化酶溶液,F(xiàn)e2+溶液,金納米簇溶液按體積比7:1:2:8混合,反應(yīng)總體積為
    0.45 mL。
    7.一種金納米簇為熒光探針的血糖測定方法,包括如下步驟,1)取新鮮人血液,經(jīng)超濾
    處理后用pH=7.4的緩沖液稀釋,取0.175 mL稀釋液加入到0.025毫升濃度為0.1 mg/mL的葡
    萄糖氧化酶溶液中,置于25℃反應(yīng)30分鐘;2)將0.05毫升濃度為0.9 mmol/L的含有40
    mmol/L硫酸的Fe2+溶液與0.2毫升金納米團(tuán)簇溶液依次加入上述步驟1)的反應(yīng)液中,搖勻后
    置于25℃水浴鍋反應(yīng)10分鐘,測定熒光強(qiáng)度值F650,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量,獲得血樣中的
    葡萄糖含量。
    8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的金納米簇為熒光探針的血糖測定方法,其特征是所使用的金
    納米簇采用N-乙酰-L-半胱氨酸還原氯金酸的方法制備:將0.6 mL濃度為0.5 mol/L的氫氧
    化鈉溶液與0.4 mL濃度為0.02 g/L的氯金酸溶液加入到4 mL濃度為0.08 mol/L的N-乙酰-
    L-半胱氨酸溶液中,混勻,置于37℃恒溫水浴槽中反應(yīng)2.5 h,反應(yīng)液由淺黃色變?yōu)闊o色,反
    應(yīng)結(jié)束后用截留分子量為3500的透析袋對反應(yīng)液進(jìn)行純化處理,純化后的金納米簇溶液放
    置于4℃冰箱避光保存。
    9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的金納米簇為熒光探針的血糖測定方法,其特征是所述的新鮮
    人血液用截留分子為3000的超濾管離心超濾,濾液用pH=7.4的HEPES緩沖液稀釋200倍后測
    定。
    展開

專利技術(shù)附圖

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    專利證書

    專利利登記簿副本

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