本發(fā)明公開(kāi)了高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法和用途，其中該高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽具有SEQ？ID？NO：1所示的氨基酸序列。本發(fā)明的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽α-葡萄糖苷酶抑制活性非常高，能夠有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性，進(jìn)而能夠有效地用于降血糖，以及治療高血糖、糖尿病藥物的制備，并且該高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的生產(chǎn)成本低，具有巨大的實(shí)用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效益。

1.一種制備由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列組成的高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽的
方法，其特征在于，包括：
利用等電點(diǎn)沉淀法從脫脂山杏仁粕粉中提取蛋白質(zhì)；
利用堿性蛋白酶對(duì)所述蛋白質(zhì)進(jìn)行水解，以便獲得水解產(chǎn)物；以及
對(duì)所述水解產(chǎn)物依次進(jìn)行超濾處理、凝膠色譜處理、第一反相高效液相色譜處理和第二
反相高效液相色譜處理，以便獲得所述高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，利用等電點(diǎn)沉淀法從脫脂山杏仁粕粉中
提取蛋白質(zhì)包括：
將所述脫脂山杏仁粕粉與水按照重量比1g：14ml的比例進(jìn)行混合，并使所得混合物在
pH9.0、溫度37攝氏度的條件下進(jìn)行水解60min，以便獲得堿提產(chǎn)物；
將所述堿提產(chǎn)物進(jìn)行第一離心，并收集第一離心上清液；
將所述第一離心上清液在等電點(diǎn)pH4.1條件下進(jìn)行酸沉，以便獲得酸沉產(chǎn)物；
將所述酸沉產(chǎn)物進(jìn)行第二離心，并收集第二離心沉淀物；以及
將所述第二離心沉淀物進(jìn)行水洗至中性，以便獲得所述蛋白質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，利用等電點(diǎn)沉淀法從脫脂山杏仁粕粉中
提取蛋白質(zhì)進(jìn)一步包括將所述蛋白質(zhì)進(jìn)行真空冷凍干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述堿性蛋白酶為Alcalase，利用
堿性蛋白酶Alcalase對(duì)所述蛋白質(zhì)進(jìn)行水解的料液比為50g/L，加酶量為2％(m/m)，pH
值為9.0，水解溫度為50℃，水解時(shí)間為6h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，對(duì)所述水解產(chǎn)物依次進(jìn)行超濾處理、凝
膠色譜處理、第一反相高效液相色譜處理和第二反相高效液相色譜處理包括：
利用截留分子量為5000的超濾膜對(duì)所述水解產(chǎn)物進(jìn)行超濾處理，以便得到濾液；
將所述濾液進(jìn)行凝膠色譜處理并對(duì)所得到的各組分進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性檢測(cè)，
以便將α-葡萄糖苷酶抑制活性最高的組分作為凝膠色譜產(chǎn)物；
將所述凝膠色譜產(chǎn)物進(jìn)行第一反相高效液相色譜處理并對(duì)所得到的各組分進(jìn)行α-葡萄
糖苷酶抑制活性檢測(cè)，以便將α-葡萄糖苷酶抑制活性較高的組分作為第一反相高效液相色
譜處理產(chǎn)物；以及
將所述第一反相高效液相色譜處理產(chǎn)物進(jìn)行第二反相高效液相色譜處理，以便對(duì)所述第
一反相高效液相色譜處理產(chǎn)物進(jìn)行純化，獲得所述高活性α-葡萄糖苷酶抑制肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述凝膠色譜處理采用SephadexG-25
Medium柱，流動(dòng)相為10mMpH7.0的Tris-HCl，流速為1ml/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述第一反相高效液相色譜處理和所述
第二反相高效液相色譜處理均是采用ZorbaxSB-C18柱進(jìn)行梯度洗脫，其中，所述梯度洗脫
均為：流動(dòng)相B(0-50％)洗脫26min，流動(dòng)相A(50-100％)洗脫4min，洗脫峰在280nm
處進(jìn)行檢測(cè)并收集；流動(dòng)相A為0.06％TFA的水，流動(dòng)相B為0.05％TFA的乙腈；流速為
0.8ml/min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，進(jìn)一步包括對(duì)所述高活性α-葡萄糖苷酶
抑制肽依次進(jìn)行質(zhì)譜分析和氨基酸序列測(cè)定。