1.一種利用芝麻菜苷制備萊菔硫烷的方法,其特征在于,包括如下步驟:
1)制備4-甲基-R-亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷:
將每克芝麻菜苷溶解于50ml的磷酸鹽緩沖液中,pH值為5-7,加入過氧化物酶和氧化
酶,其中,所述過氧化物酶與所述芝麻菜苷的摩爾比為1:2000-10000,所述氧化酶與所述過
氧化物酶的摩爾比為1:1-10,密封通入氧氣,控制溫度19-35℃,攪拌,15分鐘后,加入所述
氧化酶的相應底物,所述底物與所述芝麻菜苷的摩爾比為10-100:1,再次通入氧氣,密封,
攪拌反應2-5小時,得到4-甲基-R-亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷;其中,所述芝麻菜苷通過下
述方法制備:
將芝麻菜種子、花、莖或葉粉碎,100℃滅酶30分鐘,每千克粉末加入8-10L的磷酸鹽緩
沖液中,pH值為7,沸水下攪拌1-3小時,抽濾,pH值采用pH值緩沖液或加入碳酸鈣或鹽酸進
行調控,濾液上D261陰離子交換樹脂,柱體積為濾液體積的1/10,5倍柱體積去離子水洗雜
質,5倍柱體積2M的氯化鉀溶液洗芝麻菜苷,40℃旋干,甲醇萃取脫鹽,旋干,經高效液相色
譜檢測,得到純度80%的芝麻菜苷粗品;
2)用黑芥子酶水解步驟1)中得到的4-甲基-R-亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷制備萊菔硫
烷,制備過程具體包括:
水解時間為60分鐘,pH值采用pH值緩沖液調至6-7,pH值緩沖液選用檸檬酸-檸檬酸鈉
緩沖液,醋酸緩沖液,Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液,K2HPO4-KH2PO4緩沖液中的一種,溫度30℃,
水解后離心上清液用SP850樹脂柱純化,柱體積為上樣液體積的1/5,用3倍柱體積的去離子
水和3倍柱體積體積分數5%的乙醇溶液洗雜質,用5倍柱體積的體積分數85%乙醇洗產品,
旋蒸去除溶劑后,用二氯甲烷萃取3次,旋干后進行冷凍干燥處理,得到高純度的R-萊菔硫
烷。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述pH值為7,所述過氧化酶與所
述芝麻菜苷的摩爾比為1:10000,所述氧化酶與所述過氧化物酶的摩爾比為1:4,所述底物
與所述芝麻菜苷的摩爾比為60:1,控制溫度為28℃,反應時間為4小時。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述的過氧化物酶包括辣根
過氧化物酶、氯過氧化物酶、木質素過氧化物酶、乳過氧化物酶中的一種。
4.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述的氧化酶包括葡萄糖氧
化酶、膽固醇氧化酶、超氧化物歧化酶、尿酸氧化酶、D-氨基酸氧化酶、L-氨基酸氧化酶或L-
α-羥基酸氧化酶中的一種。
展開