本發明提供一種從楊梅果肉中分離純化四種黃酮糖苷的方法，四種黃酮糖苷為矢車菊素?3?O?葡萄糖苷、楊梅苷、金絲桃苷、槲皮苷，通過樣品提取、固相萃取柱和半制備高效液相色譜分離三個步驟完成。本發明以楊梅果肉冷凍干燥粉末為原料，經溶劑提取、C18固相萃取柱、半制備高效液相分離純化得到高純度的黃酮糖苷類化合物。本發明方法操作簡單，耗能較少。生產周期短，設備投入少，整個純化過程條件穩定容易控制。提取過程中使用的固相萃取柱和有機試劑可反復利用，節省成本。

1.一種從楊梅果肉中分離純化四種黃酮糖苷的方法，四種黃酮糖苷為矢車菊素-3-O-
葡萄糖苷、楊梅苷、金絲桃苷、槲皮苷，其特征在于，通過以下步驟實現：
（1）將楊梅果肉液氮處理后使用冷凍干燥機除去果肉水分，將冷凍干燥后的楊梅果肉
用磨樣機打磨成粉末狀；
（2）取冷凍干燥的楊梅果肉粉末，用含0.5%甲酸的80%甲醇溶液超聲提取2次，固液比為
1:20，每次30 min，經真空抽濾后，合并上清液，在旋轉蒸發儀上蒸干至無甲醇相，溶于含
0.5%甲酸的去離子水中；
（3）將步驟（2）得到的水溶液上樣C18 Sep-Pak?固相萃取柱，上樣后固相萃取柱先用
含0.5%甲酸的水洗脫4個柱床體積以去掉一些極性較高的雜質，然后依次用甲醇進行梯度
洗脫，洗脫液在旋轉蒸發儀上37℃蒸干分別得到富含花青苷的10%洗脫組分和富含黃酮醇
的50%洗脫組分；所述的固相萃取柱型號為Waters C18 Sep-Pak? Cartridges 12 cc/2
g；所述的梯度洗脫液分別為含0.5%甲酸的10%甲醇溶液、50%甲醇溶液，洗脫順序為含0.5%
甲酸的10%甲醇溶液10個柱床體積、50%甲醇溶液4個柱床體積；
（4）將10%洗脫組分用含0.1%鹽酸的甲醇溶液配制成100 mg/mL的濃度，進樣量為300 μ
L，流速為5mg/mL，收集保留時間為39.1 min的組分，在旋轉蒸發儀上37℃蒸干得到一種花
青苷單體粉末，為矢車菊素-3-O-葡萄糖苷，將50%洗脫組分用甲醇溶液配制成100 mg/mL的
濃度，進樣量為200 μL，流速為5mg/mL，分別收集保留時間為62.6、63.8、75.6 min的組分，
在旋轉蒸發儀上37℃蒸干分別得到三種黃酮醇單體粉末，分別為楊梅苷、金絲桃苷、槲皮
苷；
四種黃酮糖苷的結構式如下：
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