1.HPLC-CAD技術同時測定血清中6種鎮靜催眠類藥物含量的方法，所述的6種鎮靜催眠類藥物為地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦，其特征在于該方法包括以下的步驟：1）對照品溶液的配制精密稱取地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦對照品，分別置于容量瓶中，加入乙腈溶解，配成所需質量濃度的對照品溶液，備用，精密量取6種對照品溶液，配成所需質量濃度的混合對照品溶液，備用；2）內標溶液的配制精密稱取秋水仙堿對照品，置于容量瓶中，加入乙腈溶解，配成所需質量濃度的內標溶液，備用；3）樣品溶液制備按照睡眠障礙診斷標準，入選患者，臨床醫生根據癥狀給予1種或數種鎮靜催眠藥物進行治療，患者服藥后定時取血，分離血清，置于具塞離心試管中，定量加入步驟2）的秋水仙堿內標溶液，渦旋混勻，高速離心后，分離上清液；上清液加入至甲醇和水活化后的SPE柱，上樣后用水淋洗，適當濃度的甲醇洗脫，洗脫液揮干，用乙腈溶解，即得樣品溶液，備用；4）流動相溶液的配制取色譜純乙腈，作為流動相A相，備用；取純水，作為流動相B相，備用；5）色譜條件的設置選擇以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，規格為4.6mm×250mm，填料內徑為5.0μm的色譜柱；柱溫為30℃，流動相流速為0.8mL/min；取步驟1）的對照品溶液與步驟2）的內標溶液，定量進樣，進行梯度洗脫，梯度洗脫程序如下：0-7.00min，45%A相和55%B相；7.01min-15.00min，70%A相和30%B相；15.01min-20.00min，45%A相和55%B相；采用電噴霧檢測器進行色譜峰檢測，由此得到對照品及內標物的標準色譜圖；電噴霧檢測的條件：選擇電噴霧檢測器，氮氣壓力為35psi，量程100pA，霧化溫度30℃；6）樣品測定取步驟1）、2）、3）的對照品溶液、內標溶液和樣品溶液，分別定量進樣，在步驟5）的條件下，測定，分別得到地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦對照品，秋水仙堿內標物以及樣品的色譜圖，樣品圖譜中，與地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦對照品以及秋水仙堿內標物相同保留時間處，為血清樣品中的待測地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦，以及定量加入的秋水仙堿內標物；7）梯度濃度對照品溶液的配制精密吸取步驟1）的地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦對照品溶液，配制成混合對照品溶液，加乙腈，稀釋成梯度濃度的混合對照品溶液，備用；8）標準曲線制備取睡眠障礙的患者空白血清多份，分別定量加入步驟7）的梯度濃度混合對照品溶液，按照步驟3）方法操作，得到梯度加標樣品溶液，在步驟5）的條件下進行測定；以地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦峰面積與內標物峰面積的比值對地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦峰的濃度進行線性回歸，得到回歸方程，地西泮的標準曲線：y=0.0635x-0.5842，r=0.9940，勞拉西泮的標準曲線：y=0.0758x-0.5796，r=0.9968，阿普唑侖的標準曲線：y=0.0813x-0.6502，r=0.9946，艾司唑侖的標準曲線：y=0.0666x-0.5455，r=0.9939，氯硝西泮的標準曲線：y=0.0622x-0.4402，r=0.9972，酒石酸唑吡坦的標準曲線：y=0.1428x-0.6019，r=0.9963；其中y為被測物峰面積與內標物峰面積的比值，x為被測物質量濃度；9）數據分析計算記錄地西泮、勞拉西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、氯硝西泮、酒石酸唑吡坦和秋水仙堿的峰面積，計算6種藥物與內標秋水仙堿峰面積的比值，分別代入各自的標準曲線，計算出6種藥物的質量濃度；即為血清中藥物的濃度。2.根據權利要求1所述的HPLC-CAD技術同時測定血清中6種鎮靜催眠類藥物含量的方法，其特征在于步驟7）定量稀釋成濃度梯度為183.16μg/mL、91.58μg/mL、45.79μg/mL、18.32μg/mL、9.16μg/mL、1.83μg/mL的地西泮對照品溶液，177.44μg/mL、88.72μg/mL、44.36μg/mL、17.74μg/mL、8.72μg/mL、1.77μg/mL的艾司唑侖對照品溶液，173.56μg/mL、86.78μg/mL、43.39μg/mL、17.36μg/mL、8.68μg/mL、1.74μg/mL的勞拉西泮對照品溶液，190.04μg/mL、95.02μg/mL、47.51μg/mL、19.00μg/mL、9.52μg/mL、1.81μg/mL的氯硝西泮對照品溶液，174.40μg/mL、87.20μg/mL、43.60μg/mL、17.44μg/mL、8.72μg/mL、1.74μg/mL的阿普唑侖對照品溶液，以及100.00μg/mL、50.00μg/mL、25.00μg/mL、10.00μg/mL、5.00μg/mL、1.00μg/mL的酒石酸唑吡坦對照品溶液。3.根據權利要求1所述的HPLC-CAD技術同時測定血清中6種鎮靜催眠類藥物含量的方法，其特征在于步驟8）中取1.0mL睡眠障礙的患者空白血清6份，編號1～6號，1號加入183.16μg/mL地西泮，177.44μg/mL艾司唑侖，173.56μg/mL勞拉西泮，190.04μg/mL氯硝西泮，174.40μg/mL阿普唑侖，100.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL；2號加入91.58μg/mL地西泮，88.72μg/mL艾司唑侖，86.78μg/mL勞拉西泮，95.02μg/mL氯硝西泮，87.20μg/mL阿普唑侖，50.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL；3號加入45.79μg/mL地西泮，44.36μg/mL艾司唑侖，43.39μg/mL勞拉西泮，47.51μg/mL氯硝西泮，43.60μg/mL阿普唑侖，25.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL；4號加入18.32μg/mL地西泮，17.74μg/mL艾司唑侖，17.36μg/mL勞拉西泮，19.00μg/mL氯硝西泮，17.44μg/mL阿普唑侖，10.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL；5號加入9.16μg/mL地西泮，8.72μg/mL艾司唑侖，8.68μg/mL勞拉西泮，9.52μg/mL氯硝西泮，8.72μg/mL阿普唑侖，5.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL；6號加入1.83μg/mL地西泮，1.77μg/mL艾司唑侖，1.74μg/mL勞拉西泮，1.81μg/mL氯硝西泮，1.74μg/mL阿普唑侖，1.00μg/mL酒石酸唑吡坦對照品溶液各10μL。
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