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金絲桃素提純方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-03
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201110008134.4 
  • 技術(專利)名稱 金絲桃素提純方法 
  • 項目單位 深圳職業技術學院
  • 發明人 張俊松,王曉利,王金林 
  • 行業類別 中藥材獲取-動植物采集
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 周錦倩
  • 發布時間 2021-12-03  
  • 01

    項目簡介

    一種金絲桃素提純方法,包括:將貫葉金絲桃浸膏粉碎,與乙醇溶液溶解后超聲提取,加明膠溶液除鞣得貫葉金絲桃浸膏除鞣液;將甲基丙烯酸酯型聚合物微球與蒸餾水混懸,轉入層析柱,取貫葉金絲桃浸膏除鞣液濕法上樣,用水-乙醇溶液體系梯度洗脫,濃縮洗脫液得金絲桃素粗品;將苯乙烯型聚合物微球與丙酮溶液混懸,轉入層析柱,取金絲桃素粗品以丙酮溶液溶解后濕法上樣,用丙酮溶液梯度洗脫,處理洗脫液得金絲桃素精品;將反相硅膠填料與色譜純甲醇混懸,轉入層析柱,取金絲桃素精品以甲醇溶解后上樣,以甲醇-磷酸氫二鈉緩沖液洗脫,HPLC檢測洗脫液后合并相同成分得金絲桃素提純物。本發明用納米微球分離純化金絲桃素,產品金絲桃素含量在90%以上。
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  • 02

    說明書

    1.一種金絲桃素提純方法,其特征在于,包括如下步驟:準備步驟:將貫葉金絲桃浸膏粉碎,并加入乙醇溶液溶解后進行超聲提取獲得提取液,然后在提取液中加入明膠溶液除鞣,制得貫葉金絲桃浸膏除鞣液;甲基丙烯酸酯型聚合物微球層析步驟:將粒徑為35~45μm的甲基丙烯酸酯型聚合物微球與蒸餾水混懸,轉入層析柱,待甲基丙烯酸酯型聚合物微球沉降完全后,以蒸餾水平衡柱床,取適量貫葉金絲桃浸膏除鞣液濕法上樣于甲基丙烯酸酯型聚合物微球層析柱頂部,再用水-乙醇溶液體系進行梯度洗脫,并收集最后一次洗脫的洗脫液,濃縮制得金絲桃素粗品;苯乙烯型聚合物微球層析步驟:將粒徑為25~35μm的苯乙烯型聚合物微球與丙酮溶液混懸,轉入層析柱,待苯乙烯型聚合物微球沉降完全后,以丙酮溶液平衡柱床,取以上制得的金絲桃素粗品以丙酮溶液充分溶解后取適量濕法上樣于苯乙烯型聚合物微球柱頂部,再用丙酮溶液進行梯度洗脫,并收集最后一次洗脫的洗脫液,濃縮并調整pH值至2~3,低溫下靜置12±0.5h后離心分取沉淀,上清液再置于低溫下靜置12±0.5h,隨后再離心得沉淀,合并沉淀得金絲桃素精品;反相硅膠填料層析步驟:將反相硅膠填料與色譜純甲醇混懸,轉入層析柱,待反相硅膠微球沉降完全后,以甲醇-磷酸氫二鈉緩沖液平衡柱床,取以上制得的金絲桃素精品以甲醇充分溶解后取適量上樣于層析柱頂部,以甲醇-磷酸氫二鈉緩沖液洗脫,分步收集洗脫液,HPLC檢測后合并相同的成分,獲得金絲桃素提純物。2.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:準備步驟中,用于與貫葉金絲桃浸膏的粉碎物溶解的乙醇溶液為體積百分比濃度為60%的乙醇溶液,貫葉金絲桃浸膏與乙醇溶液的配比比例為:每1克貫葉金絲桃浸膏使用6~8mL60%的乙醇溶液,且溶解后超聲提取的時間為30±2分鐘。3.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:準備步驟中,加入的明膠溶液為10%明膠溶液,加入量為超聲提取液的1/5~1/4。4.如權利要求1或3所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:在加入明膠溶液后再調整溶液中乙醇的體積濃度至75%~80%,避光靜置12±0.5h后,過濾濃縮后即制得貫葉金絲桃浸膏除鞣液。5.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:甲基丙烯酸酯型聚合物微球層析步驟中,層析柱徑高比1:10~3.5。6.如權利要求1或5所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:甲基丙烯酸酯型聚合物微球層析步驟中,梯度洗脫時所用的試劑依次分別為:1~2.5倍柱體積的水、1~3倍柱體積的10%乙醇溶液、1.5~6倍柱體積的30%乙醇溶液、1.5~4倍柱體積的40%乙醇溶液、4~8倍柱體積的60%乙醇溶液。7.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:苯乙烯型聚合物微球層析步驟中,分別用于與苯乙烯型聚合物微球混懸、平衡柱床以及溶解金絲桃素粗品的丙酮溶液均為30%丙酮溶液。8.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:苯乙烯型聚合物微球層析步驟中,梯度洗脫所用的丙酮溶液依次分別為:1~2倍柱體積的30%丙酮溶液、1~1.5倍柱體積的50%丙酮溶液、3~8倍柱體積的70%丙酮溶液。9.如權利要求1所述的金絲桃素提純方法,其特征在于:苯乙烯型聚合物微球層析步驟中,使用鹽酸將濃縮液的pH值調至2~3;而在反相硅膠填料層析步驟中所使用的甲醇-磷酸氫二鈉緩沖液中甲醇與磷酸氫二鈉的體積比比值為87.5/12.5,且甲醇-磷酸氫二鈉緩沖液預先以磷酸將pH值調至6.5。
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專利技術附圖

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