1.一種提取的核桃酮制備核桃酮標準品的方法,其特征在于,將陰干的
山核桃外果皮,50℃真空干燥,粉碎,過60目篩,取600g原料粉中加
入濃度為10-20%的氨水,拌勻至濕潤,再加入6kg95%的乙醇,在溫度
50℃-80℃下熱回流提取4次,每次1.5h,提取液離心15min,離心轉速
3500r/min,合并上清液,減壓濃縮至浸膏狀,浸膏用300mL?1-3%鹽
酸溶解,調pH=2-4得酸水液;酸水液用300mL氯仿萃取,取下層氯仿層
,用300mL?2-4%?NaOH提取靜置,取上層堿水液,用10-20%鹽酸調p
H=7-9,靜置,下層氯仿層即樣品液,樣品液濃縮至2mL,采用制備型
GF254硅膠板,微量移液器移取2μL樣品液點于薄板近底端處,電吹風
吹干,將點好樣的薄板放在密閉展缸中,上行展開,電吹風吹干,以
氯仿:甲醇:氨水的體積比為65:1:1的混合液為展開劑展開,用碘蒸氣
顯色,刮下核桃酮所在部位的硅膠,80℃-100℃索氏抽提,真空干燥
為紅色核桃酮粗品,將C18硅膠用甲醇充分浸泡脫氣后,重力沉降法裝
成500?×?25?mm的柱,用甲醇充分洗出雜質后,再用20%乙腈水溶
液平衡,將經制備薄層層析初步純化的粗品,溶解于2ml甲醇后上柱,
并用20-40%乙腈洗脫,層析過程在常溫常壓下進行,收集核桃酮粗品
洗脫液,20ml/份,收集30份,待HPLC測定各段流份純度;分段收集核
桃酮粗品洗脫液,將HPLC檢測,流動相條件為乙腈:水=15:85(V:V)
為流動相,檢測波長:260nm,柱溫:25℃,純度大于95%的19~25號
流份合并,氮吹去凈溶劑,即得核桃酮標準品,測得純度為98.1%,產
率為350μg/g。
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