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一種葛仙米藻膽蛋白的提取、純化方法及純化的藻紅蛋白

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-11-02
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710447906.1 
  • 技術(專利)名稱 一種葛仙米藻膽蛋白的提取、純化方法及純化的藻紅蛋白 
  • 項目單位 湖南炎帝生物工程有限公司
  • 發明人 余佳,張瑞華,王玉蘭,占豪,陳盛,王維 
  • 行業類別 醫療器械-診斷設備
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊裔瑤
  • 發布時間 2021-11-02  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種葛仙米藻紅蛋白的純化方法,包括:(1)選用陰離子交換柱過柱;(2)配置PB緩沖液Buffer A和PB?NaCl緩沖液Buffer B;(3)葛仙米藻膽蛋白粗提粉末用PB緩沖液Buffer A溶解,離心,過濾;(4)洗泵,用PB緩沖液Buffer A平衡離子交換柱;(5)將步驟(3)制備的溶解于PB緩沖液Buffer A中的葛仙米藻膽蛋白直接上樣,PB?NaCl緩沖液Buffer B梯度洗脫,收集洗脫液;(6)用鹽溶液清洗離子交換柱,然后用堿溶液反向沖洗;(7)對淋洗液進行超濾濃縮,透析,得到純化的葛仙米藻紅蛋白水溶液。本發明的方法操作簡單,得到的葛仙米藻紅蛋白濃度和純度都得到顯著提高,適于工業化大規模生產。
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  • 02

    說明書

    1.一種葛仙米藻紅蛋白的純化方法,其特征在于,包括步驟:(1)選用陰離子交換柱過柱;(2)配置PB緩沖液BufferA和PB-NaCl緩沖液Buffer B;(3)葛仙米藻膽蛋白粗提粉末用PB緩沖液BufferA溶解,離心,過濾;(4)洗泵,用PB緩沖液BufferA平衡離子交換柱;(5)將步驟(3)制備的溶解于PB緩沖液BufferA中的葛仙米藻膽蛋白直接上樣,PB-NaCl緩沖液Buffer B梯度洗脫,收集洗脫液;(6)用鹽溶液清洗離子交換柱,然后用堿溶液反向沖洗;(7)對步驟(5)的洗脫液進行超濾濃縮,透析,得到純化的葛仙米藻紅蛋白水溶液;其中,PB緩沖液BufferA的pH為5~6.5;PB-NaCl緩沖液Buffer B的pH為5~6.5;所述PB緩沖液Buffer A的電導率為5~10μs/cm;PB-NaCl緩沖液Buffer B的電導率為5~10μs/cm;所述陰離子交換柱為AgarosixFF-DEAE陰離子交換柱,所述陰離子交換柱的介質為交聯度為6%的瓊脂糖凝膠。2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,所述BufferA緩沖液和Buffer B緩沖液的pH為6~6.5,電導率為6~8μs/cm。3.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,所述PB緩沖液pH為5,電導率為8.5μs/cm時,PB-NaCl緩沖液pH為5,電導率為8.5μs/cm;或,PB緩沖液pH為6,電導率為8.0μs/cm時,PB-NaCl緩沖液pH為6,電導率為8.0μs/cm;或,PB緩沖液pH為6.3,電導率為7.1μs/cm時,PB-NaCl緩沖液pH為6.3,電導率為7.1μs/cm;或,PB緩沖液pH為6.5,電導率為6.0μs/cm時,PB-NaCl緩沖液pH為6.5,電導率為6.0μs/cm。4.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,所述瓊脂糖凝膠的粒徑為50~150μm。5.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(1)過柱前先用去離子水置換離子交換柱介質中的20%的乙醇水。6.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,所述葛仙米藻膽蛋白粗提粉末、PB緩沖液的用量比5g:1L~15g:1L。7.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(7)中,所述超濾用的超濾膜孔徑為1000D~8000D。8.如權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(6)中,所述鹽溶液為NaCl或KCl,所述NaCl或KCl的濃度為0.02~0.1M;所述堿溶液為NaOH或KOH,所述NaOH或KOH的濃度為0.1~0.5M。
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