1.輔助檢測遺傳性耳聾的試劑盒,包括引物組合物;所述引物組合物由引物組Ⅰ、
引物組Ⅱ、引物組Ⅲ、引物組Ⅳ、引物組Ⅴ、引物組Ⅵ、引物組Ⅶ、引物組Ⅷ和引物
組Ⅸ組成;
所述引物組Ⅰ,為如下a1或b1:
a1、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列23自5’末端第
23至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列24自5’末端第23至41位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列25自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
b1、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列23所示的DNA、
序列表的序列24所示的DNA和序列表的序列25所示的DNA;
所述引物組Ⅱ,為如下a2或b2:
a2、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列26自5’末端第
23至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列27自5’末端第23至42位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列28自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
b2、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列26所示的DNA、
序列表的序列27所示的DNA和序列表的序列28所示的DNA;
所述引物組Ⅲ,為如下a3或b3:
a3、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列29自5’末端第
25至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列30自5’末端第24至41位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列31自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
b3、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列29所示的DNA、
序列表的序列30所示的DNA和序列表的序列31所示的DNA;
所述引物組Ⅳ,為如下a4或b4:
a4、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列32自5’末端第
25至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列33自5’末端第25至41位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列34自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
b4、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列32所示的DNA、
序列表的序列33所示的DNA和序列表的序列34所示的DNA;
所述引物組Ⅴ,為如下a5或b5:
a5、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列35自5’末端第
25至43位核苷酸所示的DNA、序列表的序列36自5’末端第24至42位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列37自5’末端第20至37位核苷酸所示的DNA;
b5、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列35所示的DNA、
序列表的序列36所示的DNA和序列表的序列37所示的DNA;
所述引物組Ⅵ,為如下a6或b6:
a6、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列38自5’末端第
23至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列39自5’末端第23至41位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列40自5’末端第20至41位核苷酸所示的DNA;
b6、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列38所示的DNA、
序列表的序列39所示的DNA和序列表的序列40所示的DNA;
所述引物組Ⅶ,為如下a7或b7:
a7、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列41自5’末端第
23至45位核苷酸所示的DNA、序列表的序列42自5’末端第23至42位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列43所示的DNA;
b7、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列41所示的DNA、
序列表的序列42所示的DNA和序列表的序列43所示的DNA;
所述引物組Ⅷ,為如下a8或b8:
a8、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列44自5’末端第
24至46位核苷酸所示的DNA、序列表的序列45自5’末端第23至43位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列46所示的DNA;
b8、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列44所示的DNA、
序列表的序列45所示的DNA和序列表的序列46所示的DNA;
所述引物組Ⅸ,為如下a9或b9:
a9、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列47自5’末端第
24至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列48自5’末端第24至45位核苷酸所示
的DNA和序列表的序列49所示的DNA;
b9、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列47所示的DNA、
序列表的序列48所示的DNA和序列表的序列49所示的DNA。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在在于:所述引物組合物中,引物組Ⅰ
的b1項中序列表的序列25所示DNA、引物組Ⅱ的b2項中序列表的序列28所示DNA、
引物組Ⅲ的b3項中序列表的序列31所示DNA、引物組Ⅳ的b4項中序列表的序列34
所示DNA、引物組Ⅴ的b5項中序列表的序列37所示DNA、引物組Ⅵ的b6項中序列表
的序列40所示DNA、引物組Ⅶ的b7項中序列表的序列43所示DNA、引物組Ⅷ的b8
項中序列表的序列46所示DNA和/或引物組Ⅸ的b9項中序列表的序列49所示DNA的
5’末端連接有生物素。
3.輔助檢測遺傳性耳聾的的試劑盒,其特征在在于:所述試劑盒包括如下試劑盒
I、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試
劑盒Ⅸ;其中,
試劑盒Ⅰ,由權利要求1或2所述引物組Ⅰ和探針組Ⅰ組成;所述探針組Ⅰ為如
下c1或d1或e1:
c1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列1所示DNA和序
列表的序列2所示DNA;
d1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列1所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列2所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列1所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列2所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅱ,由權利要求1或2所述引物組Ⅱ和探針組Ⅱ組成;所述探針組Ⅱ為如
下c2或d2或e2:
c2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列3所示DNA和序
列表的序列4所示DNA;
d2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列3所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列4所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列3所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列4所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅲ,由權利要求1或2所述引物組Ⅲ和探針組Ⅲ組成;所述探針組Ⅲ為如
下c3或d3或e3:
c3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列5所示DNA和序
列表的序列6所示DNA;
d3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列5所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列6所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列5所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列6所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅳ,由權利要求1或2所述引物組Ⅳ和探針組Ⅳ組成;所述探針組Ⅳ為如
下c4或d4或e4:
c4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列7所示DNA和序
列表的序列8所示DNA;
d4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列7所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列8所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列7所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列8所示DNA的5’末端連接特異片
段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅴ,由權利要求1或2所述引物組Ⅴ和探針組Ⅴ組成;所述探針組Ⅴ為如
下c5或d5或e5:
c5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列9所示DNA和序
列表的序列10所示DNA;
d5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列9所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列10所示DNA的5’末端連接特異
片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列9所示DNA的
5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列10所示DNA的5’末端連接特異
片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端
第一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅵ,由權利要求1或2所述引物組Ⅵ和探針組Ⅵ組成;所述探針組Ⅵ為如
下c6或d6或e6:
c6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列11所示DNA和序
列表的序列12所示DNA;
d6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列11所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列12所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列11所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列12所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
端第一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅶ,由權利要求1或2所述引物組Ⅶ和探針組Ⅶ組成;所述探針組Ⅶ為如
下c7或d7或e7:
c7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列15所示DNA和序
列表的序列16所示DNA;
d7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列15所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列16所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列15所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列16所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
端第一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅷ,由權利要求1或2所述引物組Ⅷ和探針組Ⅷ組成;所述探針組Ⅷ為如
下c8或d8或e8:
c8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列17所示DNA和序
列表的序列18所示DNA;
d8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列17所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列18所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列17所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列18所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
端第一位核苷酸修飾有氨基;
試劑盒Ⅸ,由權利要求1或2所述引物組Ⅸ和探針組Ⅸ組成;所述探針組Ⅸ為如
下c9或d9或e9:
c9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列13所示DNA和序
列表的序列14所示DNA;
d9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列13所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列14所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
e9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列13所示DNA
的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列14所示DNA的5’末端連接特
異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
端第一位核苷酸修飾有氨基。
4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于:所述探針組Ⅰ-IX中,d1-d9
項中的所述特異片段均為15個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;e1-e9項中的所述特異
片段均為15個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第一位核苷酸修飾有氨基。
5.如權利要求4所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括基片,權利要求3
或4中所述的試劑盒Ⅰ、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試
劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒Ⅸ,和顆粒;所述權利要求3或4中所述的試劑盒Ⅰ、試
劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒
Ⅸ中的探針組固定于所述基片上,形成微陣列芯片;所述基片的材質為硅、玻璃、塑
料、水凝膠、硝酸纖維或尼龍;所述顆粒為微球或磁性微球。
6.如權利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括序列表的序列
52所示的DNA。
7.如權利要求6所述的試劑盒,其特征在于:所述微陣列芯片上還排列有陽性對
照MC、陽性對照PC、陰性對照NC和陽性對照QC;所述陽性對照MC為序列表的序列
19所示的DNA;所述陽性對照PC為序列表的序列20所示的DNA;所述陰性對照NC為
序列表的序列21所示的DNA;所述陽性對照QC為序列表的序列22所示的DNA。
8.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括序列表的序列
51所示的DNA和如下DNA(A)或(B):
(A)序列表的序列50自5’末端第23至41位核苷酸所示的DNA;
(B)序列表的序列50所示的DNA。
9.如權利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述顆粒為鏈霉親和素包被的顆粒。
10.如權利要求6所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列52所示DNA的5’
末端連接有生物素。
11.如權利要求8所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列51所示DNA的5’
末端連接有生物素。
12.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列19所示DNA的3’
末端連接有生物素;序列表的序列22所示DNA的3’末端連接熒光素HEX。
13.權利要求1或2所述的試劑盒中的引物組Ⅰ、引物組Ⅱ、引物組Ⅲ、引物組
Ⅳ、引物組Ⅴ、引物組Ⅵ、引物組Ⅶ、引物組Ⅷ和引物組Ⅸ在制備輔助檢測遺傳性耳
聾的試劑盒中的應用。
14.權利要求3或4的所述試劑盒中的試劑盒Ⅰ、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒
Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒Ⅸ在制備輔助檢測遺傳性耳
聾的試劑盒中的應用。
展開