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一種檢測遺傳性耳聾的試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-13
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010247324.7 
  • 技術(專利)名稱 一種檢測遺傳性耳聾的試劑盒 
  • 項目單位 博奧生物有限公司
  • 發明人 張冠斌,項光新,邢婉麗,程京 
  • 行業類別 醫療器械-診斷設備
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛麗佳
  • 發布時間 2022-01-13  
  • 01

    項目簡介

    本發明提出了一種檢測遺傳性耳聾的試劑盒。本發明的試劑盒包括針對GJB2(Cx26)基因、SLC26A4(PDS)基因和12S rRNA(MTRNR1)基因上的九個遺傳性耳聾的多態性位點的引物組合物和探針組合物,可用于準確判斷相關位點為野生型、純合突變型或者雜合型,實現耳聾分子診斷。應用本發明的試劑盒可以通過價廉的設備或者肉眼觀察進行檢測。本發明提供的引物組、試劑組以及試劑盒可以用于遺傳性耳聾的篩查,實現早期發現、提早預防以及產前指導,具有重大的商業價值和社會意義。
    展開
  • 02

    說明書

    1.輔助檢測遺傳性耳聾的試劑盒,包括引物組合物;所述引物組合物由引物組Ⅰ、
    引物組Ⅱ、引物組Ⅲ、引物組Ⅳ、引物組Ⅴ、引物組Ⅵ、引物組Ⅶ、引物組Ⅷ和引物
    組Ⅸ組成;
    所述引物組Ⅰ,為如下a1或b1:
    a1、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列23自5’末端第
    23至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列24自5’末端第23至41位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列25自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
    b1、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列23所示的DNA、
    序列表的序列24所示的DNA和序列表的序列25所示的DNA;
    所述引物組Ⅱ,為如下a2或b2:
    a2、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列26自5’末端第
    23至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列27自5’末端第23至42位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列28自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
    b2、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列26所示的DNA、
    序列表的序列27所示的DNA和序列表的序列28所示的DNA;
    所述引物組Ⅲ,為如下a3或b3:
    a3、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列29自5’末端第
    25至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列30自5’末端第24至41位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列31自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
    b3、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列29所示的DNA、
    序列表的序列30所示的DNA和序列表的序列31所示的DNA;
    所述引物組Ⅳ,為如下a4或b4:
    a4、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列32自5’末端第
    25至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列33自5’末端第25至41位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列34自5’末端第20至39位核苷酸所示的DNA;
    b4、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列32所示的DNA、
    序列表的序列33所示的DNA和序列表的序列34所示的DNA;
    所述引物組Ⅴ,為如下a5或b5:
    a5、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列35自5’末端第
    25至43位核苷酸所示的DNA、序列表的序列36自5’末端第24至42位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列37自5’末端第20至37位核苷酸所示的DNA;
    b5、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列35所示的DNA、
    序列表的序列36所示的DNA和序列表的序列37所示的DNA;
    所述引物組Ⅵ,為如下a6或b6:
    a6、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列38自5’末端第
    23至42位核苷酸所示的DNA、序列表的序列39自5’末端第23至41位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列40自5’末端第20至41位核苷酸所示的DNA;
    b6、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列38所示的DNA、
    序列表的序列39所示的DNA和序列表的序列40所示的DNA;
    所述引物組Ⅶ,為如下a7或b7:
    a7、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列41自5’末端第
    23至45位核苷酸所示的DNA、序列表的序列42自5’末端第23至42位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列43所示的DNA;
    b7、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列41所示的DNA、
    序列表的序列42所示的DNA和序列表的序列43所示的DNA;
    所述引物組Ⅷ,為如下a8或b8:
    a8、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列44自5’末端第
    24至46位核苷酸所示的DNA、序列表的序列45自5’末端第23至43位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列46所示的DNA;
    b8、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列44所示的DNA、
    序列表的序列45所示的DNA和序列表的序列46所示的DNA;
    所述引物組Ⅸ,為如下a9或b9:
    a9、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列47自5’末端第
    24至44位核苷酸所示的DNA、序列表的序列48自5’末端第24至45位核苷酸所示
    的DNA和序列表的序列49所示的DNA;
    b9、由如下三種核苷酸序列的DNA組成的引物組:序列表的序列47所示的DNA、
    序列表的序列48所示的DNA和序列表的序列49所示的DNA。
    2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在在于:所述引物組合物中,引物組Ⅰ
    的b1項中序列表的序列25所示DNA、引物組Ⅱ的b2項中序列表的序列28所示DNA、
    引物組Ⅲ的b3項中序列表的序列31所示DNA、引物組Ⅳ的b4項中序列表的序列34
    所示DNA、引物組Ⅴ的b5項中序列表的序列37所示DNA、引物組Ⅵ的b6項中序列表
    的序列40所示DNA、引物組Ⅶ的b7項中序列表的序列43所示DNA、引物組Ⅷ的b8
    項中序列表的序列46所示DNA和/或引物組Ⅸ的b9項中序列表的序列49所示DNA的
    5’末端連接有生物素。
    3.輔助檢測遺傳性耳聾的的試劑盒,其特征在在于:所述試劑盒包括如下試劑盒
    I、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試
    劑盒Ⅸ;其中,
    試劑盒Ⅰ,由權利要求1或2所述引物組Ⅰ和探針組Ⅰ組成;所述探針組Ⅰ為如
    下c1或d1或e1:
    c1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列1所示DNA和序
    列表的序列2所示DNA;
    d1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列1所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列2所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e1、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列1所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列2所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
    一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅱ,由權利要求1或2所述引物組Ⅱ和探針組Ⅱ組成;所述探針組Ⅱ為如
    下c2或d2或e2:
    c2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列3所示DNA和序
    列表的序列4所示DNA;
    d2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列3所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列4所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e2、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列3所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列4所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
    一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅲ,由權利要求1或2所述引物組Ⅲ和探針組Ⅲ組成;所述探針組Ⅲ為如
    下c3或d3或e3:
    c3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列5所示DNA和序
    列表的序列6所示DNA;
    d3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列5所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列6所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e3、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列5所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列6所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
    一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅳ,由權利要求1或2所述引物組Ⅳ和探針組Ⅳ組成;所述探針組Ⅳ為如
    下c4或d4或e4:
    c4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列7所示DNA和序
    列表的序列8所示DNA;
    d4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列7所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列8所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e4、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列7所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列8所示DNA的5’末端連接特異片
    段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第
    一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅴ,由權利要求1或2所述引物組Ⅴ和探針組Ⅴ組成;所述探針組Ⅴ為如
    下c5或d5或e5:
    c5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列9所示DNA和序
    列表的序列10所示DNA;
    d5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列9所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列10所示DNA的5’末端連接特異
    片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e5、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列9所示DNA的
    5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列10所示DNA的5’末端連接特異
    片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端
    第一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅵ,由權利要求1或2所述引物組Ⅵ和探針組Ⅵ組成;所述探針組Ⅵ為如
    下c6或d6或e6:
    c6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列11所示DNA和序
    列表的序列12所示DNA;
    d6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列11所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列12所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e6、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列11所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列12所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
    端第一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅶ,由權利要求1或2所述引物組Ⅶ和探針組Ⅶ組成;所述探針組Ⅶ為如
    下c7或d7或e7:
    c7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列15所示DNA和序
    列表的序列16所示DNA;
    d7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列15所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列16所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e7、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列15所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列16所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
    端第一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅷ,由權利要求1或2所述引物組Ⅷ和探針組Ⅷ組成;所述探針組Ⅷ為如
    下c8或d8或e8:
    c8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列17所示DNA和序
    列表的序列18所示DNA;
    d8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列17所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列18所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e8、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列17所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列18所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
    端第一位核苷酸修飾有氨基;
    試劑盒Ⅸ,由權利要求1或2所述引物組Ⅸ和探針組Ⅸ組成;所述探針組Ⅸ為如
    下c9或d9或e9:
    c9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:序列表的序列13所示DNA和序
    列表的序列14所示DNA;
    d9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列13所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列14所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;
    e9、由如下兩種核苷酸序列的DNA組成的探針組:在序列表的序列13所示DNA
    的5’末端連接特異片段得到的DNA和在序列表的序列14所示DNA的5’末端連接特
    異片段得到的DNA;所述特異片段為5-30個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末
    端第一位核苷酸修飾有氨基。
    4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于:所述探針組Ⅰ-IX中,d1-d9
    項中的所述特異片段均為15個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA;e1-e9項中的所述特異
    片段均為15個脫氧核糖核苷酸T組成的DNA,且5’末端第一位核苷酸修飾有氨基。
    5.如權利要求4所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括基片,權利要求3
    或4中所述的試劑盒Ⅰ、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試
    劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒Ⅸ,和顆粒;所述權利要求3或4中所述的試劑盒Ⅰ、試
    劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒
    Ⅸ中的探針組固定于所述基片上,形成微陣列芯片;所述基片的材質為硅、玻璃、塑
    料、水凝膠、硝酸纖維或尼龍;所述顆粒為微球或磁性微球。
    6.如權利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括序列表的序列
    52所示的DNA。
    7.如權利要求6所述的試劑盒,其特征在于:所述微陣列芯片上還排列有陽性對
    照MC、陽性對照PC、陰性對照NC和陽性對照QC;所述陽性對照MC為序列表的序列
    19所示的DNA;所述陽性對照PC為序列表的序列20所示的DNA;所述陰性對照NC為
    序列表的序列21所示的DNA;所述陽性對照QC為序列表的序列22所示的DNA。
    8.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括序列表的序列
    51所示的DNA和如下DNA(A)或(B):
    (A)序列表的序列50自5’末端第23至41位核苷酸所示的DNA;
    (B)序列表的序列50所示的DNA。
    9.如權利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述顆粒為鏈霉親和素包被的顆粒。
    10.如權利要求6所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列52所示DNA的5’
    末端連接有生物素。
    11.如權利要求8所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列51所示DNA的5’
    末端連接有生物素。
    12.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于:序列表的序列19所示DNA的3’
    末端連接有生物素;序列表的序列22所示DNA的3’末端連接熒光素HEX。
    13.權利要求1或2所述的試劑盒中的引物組Ⅰ、引物組Ⅱ、引物組Ⅲ、引物組
    Ⅳ、引物組Ⅴ、引物組Ⅵ、引物組Ⅶ、引物組Ⅷ和引物組Ⅸ在制備輔助檢測遺傳性耳
    聾的試劑盒中的應用。
    14.權利要求3或4的所述試劑盒中的試劑盒Ⅰ、試劑盒Ⅱ、試劑盒Ⅲ、試劑盒
    Ⅳ、試劑盒Ⅴ、試劑盒Ⅵ、試劑盒Ⅶ、試劑盒Ⅷ和試劑盒Ⅸ在制備輔助檢測遺傳性耳
    聾的試劑盒中的應用。
    展開

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