1.檢測SCML2的即用型快速酶免疫組織化學試劑盒的非診斷目的的使用方法,其特征在于:所述試劑盒包括盒體,所述盒體中包括以下容器:3%H2O2去離子水容器,其內試劑成分為3%H2O2;粉劑型抗原修復液容器,其內試劑成分為粉劑型抗原修復液;粉劑型磷酸鹽緩沖液容器,其內試劑成分為粉劑型磷酸鹽緩沖液;單克隆小鼠抗人SCML2抗體容器,其內試劑成分為單克隆小鼠抗人SCML2抗體,儲存濃度為0.2μg/μL;聚合物增強劑容器,其內試劑成分為聚合物增強劑;HRP酶標抗鼠IgG聚合物容器,其內試劑成分為HRP酶標抗鼠IgG聚合物;二氨基聯苯胺容器,其內試劑成分為二氨基聯苯胺;所述試劑盒的使用方法包括以下步驟:(1)切片和烤片:石蠟包埋組織5μm連續切片,貼于載玻片上,在電熱恒溫干燥箱內烘片1h,所述烘片溫度為67℃;(2)脫蠟、水化組織切片:二甲苯5 min×2次→無水乙醇5 min×1次→95%乙醇5 min×1次→80%乙醇5min→70%乙醇5 min→自來水沖洗片刻→0.01mol/L PBS沖洗1 min×3次;(3)阻斷內源性過氧化物酶:每張切片滴加1滴3%H2O2去離子水容器內的試劑,室溫10min,0.01 mol/L PBS沖洗3 min×3次;(4)抗原修復:高壓鍋內加適量的水置電磁爐上煮沸,取粉劑型抗原修復液容器內的試劑配制成抗原修復液,將切片浸入裝有抗原修復液的瓷缸中,所述抗原修復液的成分為0.01 mol/L檸檬酸緩沖液,所述檸檬酸緩沖液的pH為6.0,放入高壓鍋內,加熱至噴氣,維持3 min;取出瓷缸使抗原修復液自然冷卻至室溫,0.01 mol/L PBS沖洗3 min×3次;(5)一抗反應:甩去切片上的PBS液,取單克隆小鼠抗人SCML2抗體容器內的試劑,按照1:100的比例進行稀釋,并滴加到切片上,室溫孵育2 h;0.01 mol/L PBS沖洗3min×3次;(6)滴加聚合物增強劑:擦去多余水分,滴加1滴聚合物增強劑容器內的試劑,室溫孵育20 min;0.01 mol/L PBS沖洗3 min×3次;(7)二抗反應:甩去多余水分,滴加1滴HRP酶標抗鼠IgG聚合物容器內的試劑,室溫孵育30min,0.01mol/L PBS沖洗3min×3次;(8)顯色:除去PBS液,每張切片滴加1滴由二氨基聯苯胺容器內的試劑新鮮配制的二氨基聯苯胺工作液,同時在顯微鏡下觀察控制顯色程度,待出現陽性反應,則置流水下沖洗及時終止反應;(9)襯染:蘇木素復染30s~2min,流水沖洗,1%鹽酸-乙醇分化,流水沖洗;(10)脫水:70%乙醇3 min→80%乙醇3 min→95%乙醇3 min→無水乙醇3 min→二甲苯3min×2次;(11)封片:中性樹脂封固;(12)顯微鏡下觀察確定SCML2抗原的表達水平和細胞定位情況。
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