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供體角膜HBV和TP的熒光定量PCR檢測試劑盒及檢測方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-25
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201010147924.6 
  • 技術(shù)(專利)名稱 供體角膜HBV和TP的熒光定量PCR檢測試劑盒及檢測方法 
  • 項(xiàng)目單位 山東省眼科研究所
  • 發(fā)明人 謝立信,陳鵬 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)療器械-診斷設(shè)備
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 陳遵婷
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-09-25  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    一種供體角膜HBV和TP的熒光定量PCR檢測試劑盒及檢測方法。試劑盒由DNA提取試劑、DNA擴(kuò)增試劑和陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品組成。其中DNA擴(kuò)增試劑包括預(yù)混試劑,20X熒光探針增強(qiáng)劑,正、反向HBV引物,HBV熒光探針,正、反向TP引物,TP熒光探針,無核酸酶的蒸餾水,HBV和TP陰性對照與陽性對照;陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品為含有HBV正、反向引物擴(kuò)增的目的序列pUC57-HBV質(zhì)粒,含有TP正、反向引物擴(kuò)增的目的序列pUC57-TP質(zhì)粒。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了對臨床供體結(jié)膜組織標(biāo)本的完全閉管檢測,不需PCR后處理,避免了交叉污染;同時(shí)采用實(shí)時(shí)檢測,所得Ct值和原始模板數(shù)量完全呈線性相關(guān),定量準(zhǔn)確率極高,相對誤差約為50%,足以適應(yīng)臨床核酸定量的要求。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種供體角膜HBV和TP的熒光定量PCR檢測試劑盒,其特征在
    于試劑盒由DNA提取試劑、DNA擴(kuò)增試劑和陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品組成;其中
    DNA提取試劑為硅膠膜通用型DNA小提試劑盒;DNA擴(kuò)增試劑包括2.5
    X?PCR預(yù)混試劑,20X熒光探針增強(qiáng)劑,正向及反向HBV引物,HBV熒
    光探針,正向及反向TP引物,TP熒光探針,無核酸酶的蒸餾水,HBV陰
    性對照,HBV陽性對照,TP陰性對照,TP陽性對照;陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品分
    別為含有HBV正向和反向引物擴(kuò)增的目的序列的pUC57-HBV質(zhì)粒,含
    有TP正向和反向引物擴(kuò)增的目的序列的pUC57-TP質(zhì)粒;上述的HBV和
    TP的引物、熒光探針與陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品序列如下:
    HBV:
    正向HBV引物:TCCTGGCTATCGCTGGATGT
    反向HBV引物:AGGCATAGCAGCAGGATGAAG
    HBV熒光探針序列:FAM+CTGCGGCGTTTTATCATATTCC+TAMRA
    HBV擴(kuò)增片段長度為66bp;
    HBV陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品的目的序列為:
    Tggccaaaattcgcagtccccaacctccaatcactcaccaacctcttgtcctccaacttgtcctggctatcgctgg
    atgtgtctgcggcgttttatcatattcctcttcatcctgctgctatgcctcatcttcttgttggttcttctggactaccaa
    ggtatgttgcccgtttgtcctctacttccaggaacatcaactaccagcacgggaccatgcagaacctgcacgatt
    cctgctca
    HBV陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品的目的基因的片段長度為240bp;
    TP:
    正向TP引物:ATCCGGCATATGTCCAAGCT
    反向TP引物:TGTGAGCGTCTCATCATTCCA
    TP熒光探針序列:FAM+TCATGCACCAGCTTCGACGTCT+TAMRA
    TP擴(kuò)增片段長度為65bp
    TP陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品的目的序列為:
    gtgtacatgtgcacgtagcactaatgtcgagactgaaaaggagtgcacagaacagcatggggtatctgcatctg
    ctgtgcaggatccggcatatgtccaagctgtcatgcaccagcttcgacgtctttggaatgatgagacgctcacac
    ttgttatgcataatggaaagtttgattatcacgttatgcatcgtgcaggcgtttttgagcactgtgcatgtaatattttc
    gatacgatggt
    TP陽性工作標(biāo)準(zhǔn)品的目的基因的片段長度為240bp。
    2.權(quán)利要求1的檢測試劑盒應(yīng)用于臨床眼庫供體少量結(jié)膜組織標(biāo)本中
    的HBV和TP的檢測。
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專利技術(shù)附圖

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