本發明公開一種J亞群禽白血病病毒基因檢測用引物組、檢測方法和快速檢測試劑盒，該引物組由外引物F3、外引物B3、內引物FIP和內引物BIP這四條引物組成，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示，其中，R為G或A，Y為T、U或C。本發明采用上述引物組，在優化的最佳體系下對待測樣品DNA進行環介導等溫擴增反應，陽性反應在瓊脂糖凝膠電泳中顯示梯狀帶，同時在反應產物中加入顯色劑，陽性反應會發生明顯的顏色變化。本發明的引物組和試劑盒均可高效高特異性地檢測J亞群禽白血病病毒基因，在不足1h即可完成擴增反應，檢測成本低、耗時短、產率高，特異性高，且陰陽性結果顯色差異顯著，驗證率高，更加明顯可靠。

1.一種J亞群禽白血病病毒基因檢測用引物組，其特征在于該引物組由
如下四條引物組成：
外引物F3，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示；
外引物B3，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示；
內引物FIP，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示；
內引物BIP，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：4所示；
其中，R為G或A，Y為T或C。
2.一種J亞群禽白血病病毒基因快速檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒包
含：
a.權利要求1所述J亞群禽白血病病毒基因檢測用引物組，FIP、BIP、F3和
B3，各25pM/ul；
b.陽性對照品：攜帶J亞群禽白血病病毒基因的質粒DNA，100ng/ul；
c.顯色劑：SYBR?Green?I或EvaGreen；
d.Bst?DNA聚合酶或Bst?DNA聚合酶大片段，8U/ul；
e.反應液：含有10×反應緩沖液、5M/L的甜菜堿、100mM/L的硫酸鎂和
2.5mM/L的dNTP，所述10×反應緩沖液、甜菜堿、硫酸鎂和dNTP的體積比為
2.5∶2∶1∶8；所述10×反應緩沖液含有200mM?pH?8.8的Tris-HCl、100mM的
KCl、100mM的(NH₄)₂SO₄、20mM的MgSO₄和1％Triton?X-100。
3.根據權利要求2所述試劑盒，其特征在于該試劑盒還包含液體石蠟油。