本發明提供一種用于檢測臨床和環境標本中軍團菌的引物組合，所述引物組合包括用于PCR特異性擴增mip基因的引物對(Seq ID No.1-2)以及用于PCR特異性擴增16S rRNA的引物對(Seq ID No.3-4)。本發明還提供含有上述引物組合的檢測試劑盒。通過對320份臨床肺炎患者的痰和肺泡灌洗液及210份環境水標本的驗證，本發明的引物組合特異性達到100％，最低檢出限為2×10cfu/ml。該雙重PCR系統在菌株的鑒定，臨床和環境標本的檢測中得到了成功的應用，基于該雙重PCR系統建立的PCR檢測方法，具有簡便、快速、可靠的特點，有望在流行病學的初步調查，環境水監測，臨床標本的檢測中得到更廣泛的應用。

1.一種引物組合，其特征在于，所述引物組合包括用于PCR特異性擴增mip基因的引物
對I以及用于PCR特異性擴增16SrRNA的引物對II；引物序列如下：
引物對I：
上游引物QT15′-GCAATGGCTAAAGGCATG-3′
下游引物QT25′-AATACAACAACGCCTGGCTTG-3′
引物對II：
上游引物16sQ-F5′-AGGGTTGATAGGTTAAGAGC-3′
下游引物16sQ-R5′-CCAACAGCTAGTTGACATCG-3′。
2.含有權利要求1所述引物組合的用于檢測嗜肺軍團菌和非嗜肺軍團菌的試劑盒。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括dNTPs、TaqDNA聚合
酶、PCR反應緩沖液中的一種或多種。
4.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括標準陽性模板。
5.權利要求1所述引物組合或權利要求2-4任一項所述試劑盒在檢測環境樣本中嗜肺
軍團菌和非嗜肺軍團菌污染中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：
1)提取環境樣品中的DNA；
2)以步驟1)中提取的DNA為模板，利用引物對I和II進行PCR擴增反應；
3)分析PCR產物。
7.根據權利要求5或6所述的應用，其特征在于，PCR反應體系以30μl計為：


8.根據權利要求5或6所述的應用，其特征在于，PCR反應條件為：94℃2分鐘，61℃45秒，
72℃45秒，1個循環；94℃45秒，61℃45秒，72℃45秒，共33個循環。