1.一種引物組合,其特征在于,所述引物組合包括用于PCR特異性擴增mip基因的引物
對I以及用于PCR特異性擴增16SrRNA的引物對II;引物序列如下:
引物對I:
上游引物QT15′-GCAATGGCTAAAGGCATG-3′
下游引物QT25′-AATACAACAACGCCTGGCTTG-3′
引物對II:
上游引物16sQ-F5′-AGGGTTGATAGGTTAAGAGC-3′
下游引物16sQ-R5′-CCAACAGCTAGTTGACATCG-3′。
2.含有權利要求1所述引物組合的用于檢測嗜肺軍團菌和非嗜肺軍團菌的試劑盒。
3.根據權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括dNTPs、TaqDNA聚合
酶、PCR反應緩沖液中的一種或多種。
4.根據權利要求2或3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括標準陽性模板。
5.權利要求1所述引物組合或權利要求2-4任一項所述試劑盒在檢測環境樣本中嗜肺
軍團菌和非嗜肺軍團菌污染中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,包括以下步驟:
1)提取環境樣品中的DNA;
2)以步驟1)中提取的DNA為模板,利用引物對I和II進行PCR擴增反應;
3)分析PCR產物。
7.根據權利要求5或6所述的應用,其特征在于,PCR反應體系以30μl計為:
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8.根據權利要求5或6所述的應用,其特征在于,PCR反應條件為:94℃2分鐘,61℃45秒,
72℃45秒,1個循環;94℃45秒,61℃45秒,72℃45秒,共33個循環。