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用于檢測軍團菌的引物組合及試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-10-01
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410339450.3 
  • 技術(專利)名稱 用于檢測軍團菌的引物組合及試劑盒 
  • 項目單位 中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所
  • 發明人 秦天,任紅宇,邵祝軍 
  • 行業類別 中藥材獲取-非動植物采選
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 楊一函
  • 發布時間 2021-10-01  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供一種用于檢測臨床和環境標本中軍團菌的引物組合,所述引物組合包括用于PCR特異性擴增mip基因的引物對(Seq ID No.1-2)以及用于PCR特異性擴增16S rRNA的引物對(Seq ID No.3-4)。本發明還提供含有上述引物組合的檢測試劑盒。通過對320份臨床肺炎患者的痰和肺泡灌洗液及210份環境水標本的驗證,本發明的引物組合特異性達到100%,最低檢出限為2×10cfu/ml。該雙重PCR系統在菌株的鑒定,臨床和環境標本的檢測中得到了成功的應用,基于該雙重PCR系統建立的PCR檢測方法,具有簡便、快速、可靠的特點,有望在流行病學的初步調查,環境水監測,臨床標本的檢測中得到更廣泛的應用。
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  • 02

    說明書

    1.一種引物組合,其特征在于,所述引物組合包括用于PCR特異性擴增mip基因的引物
    對I以及用于PCR特異性擴增16SrRNA的引物對II;引物序列如下:
    引物對I:
    上游引物QT15′-GCAATGGCTAAAGGCATG-3′
    下游引物QT25′-AATACAACAACGCCTGGCTTG-3′
    引物對II:
    上游引物16sQ-F5′-AGGGTTGATAGGTTAAGAGC-3′
    下游引物16sQ-R5′-CCAACAGCTAGTTGACATCG-3′。
    2.含有權利要求1所述引物組合的用于檢測嗜肺軍團菌和非嗜肺軍團菌的試劑盒。
    3.根據權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括dNTPs、TaqDNA聚合
    酶、PCR反應緩沖液中的一種或多種。
    4.根據權利要求2或3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括標準陽性模板。
    5.權利要求1所述引物組合或權利要求2-4任一項所述試劑盒在檢測環境樣本中嗜肺
    軍團菌和非嗜肺軍團菌污染中的應用。
    6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,包括以下步驟:
    1)提取環境樣品中的DNA;
    2)以步驟1)中提取的DNA為模板,利用引物對I和II進行PCR擴增反應;
    3)分析PCR產物。
    7.根據權利要求5或6所述的應用,其特征在于,PCR反應體系以30μl計為:


    8.根據權利要求5或6所述的應用,其特征在于,PCR反應條件為:94℃2分鐘,61℃45秒,
    72℃45秒,1個循環;94℃45秒,61℃45秒,72℃45秒,共33個循環。
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專利技術附圖

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