本發明提供了一種培養人羊膜上皮細胞的培養基及應用，該培養基由以下四種組方組成：（1）改良的MCDB153基礎培養基；（2）血清替代組合物；（3）細胞生長因子組合物；（4）一種小分子物質。本發明所提供的培養基不含血清或血漿（包括動物或人血清或血漿），因此，使用該體系培養人上皮細胞，在細胞治療過程中將避免因動物血清或血漿引起的人畜共患病的風險。此外，該培養基組方成分明確，避免了因使用血清或血漿或血小板等血制品引起的批次間差異。該培養基適于人上皮細胞包括羊膜上皮細胞的培養，在組織工程等研究中應用前景廣闊。

1.一種培養人羊膜上皮細胞的培養基，其特征在于：該培養基由以下四種組方組成：
（1）改良的MCDB153基礎培養基；
（2）血清替代組合物；
（3）細胞生長因子組合物；
（4）小分子物質；
所述改良的MCDB153基礎培養基是在MCDB153培養基基礎上，添加了20-200mg/L D-纈
氨酸和1-20nM鉬；
所述血清替代組合物包括：0.5-5g/L人白蛋白、1-10μg/mL人胰島素、1-10μg/mL人轉鐵
蛋白、0.5-10μL/L乙醇胺、1-50mg/L O-磷酸乙醇胺、1mL/L脂類混合物、10^-7M -10^-5M腎上腺
皮質激素、0.5-5ng/mL甲狀腺素T3或其鈉鹽；
所述細胞生長因子組合物包括：0.1-100ng/mL人堿性成纖維細胞生長因子；20-200ng/
mL人轉化生長因子-alpha；20-200ng/mL人表皮生長因子；1-1000pg/mL人催乳素；
所述小分子物質是孕酮，用量為25μM。
2.根據權利要求1所述的培養人羊膜上皮細胞的培養基，其特征在于：D-纈氨酸用量為
45-150mg/L；鉬含量2.5-7.5nM。
3.根據權利要求1所述的培養人羊膜上皮細胞的培養基，其特征在于：D-纈氨酸用量濃
度為50mg/L；鉬用量濃度為5nM。
4.根據權利要求1所述的培養人羊膜上皮細胞的培養基，其特征在于：所述血清替代組
合物包括：2g/L人白蛋白、5μg/mL人胰島素、5μg/mL人轉鐵蛋白、2μL/L乙醇胺、15mg/L O-磷
酸乙醇胺、1mL/L脂類混合物、10^-6M腎上腺皮質激素、1.5ng/mL甲狀腺素T3或其鈉鹽。
5.根據權利要求1所述的培養人羊膜上皮細胞的培養基，其特征在于：所述細胞生長因
子組合物包括：10ng/mL人堿性成纖維細胞生長因子；50ng/mL人轉化生長因子-alpha；
50ng/mL人表皮生長因子；100pg/mL人催乳素。
6.權利要求1-5任一項所述的培養基在人羊膜上皮細胞培養中的應用。