本發明公開了一種以川貝母植株葉為外植體的鱗莖快速增殖方法，該方法包括愈傷組織的誘導、愈傷組織的增殖和分化小鱗莖、以及小鱗莖生長各步驟，所采用的誘導愈傷組織培養基為MS+6-BA1.0～2.0mg·L+IAA0.1～0.5mg·L+蔗糖30～50g·L+瓊脂6.0～7.0g·L，愈傷組織增殖培養基為MS+6-BA2.0mg·L+NAA0.5～1mg·L+蔗糖30～50g·L+瓊脂6.0～7.0g·L，分化鱗莖培養基為MS+6-BA2.0mg·L+NAA0.1～0.4mg·L+蔗糖30～50g·L+瓊脂6.0～7.0g·L；小鱗莖生長培養基為MS+6-BA2.0mg·L+NAA0.5mg·L+蔗糖30～50g·L+瓊脂6.0～7.0g·L。本發明可以大量快速繁殖川貝母鱗莖，且培養成本低，繁殖率高。

1.一種以川貝母植株葉為外植體的鱗莖快速增殖方法，其特征
在于包括下列步驟：
(1)愈傷組織的誘導：選取已經消毒處理的川貝母植株葉為外植
體，將其在超凈工作臺上切成小片，接種于誘導愈傷組織培養基中，
培養基的配制為：MS+6-BA1.0～2.0mg·L^-1+IAA0.1～0.5mg·L^-1+
蔗糖30g·L-1+瓊脂6.0～7.0g·L^-1，pH值為5.6～6.0，培養條件為：
溫度20～21℃，每天光照12小時，光照強度為1000～1800lx；
(2)愈傷組織增殖：將(1)步驟誘導產生的愈傷組織切成適當
大小并轉接到愈傷組織增殖培養基中進行增殖培養，培養基的配制
為：MS+6-BA2.0mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1+蔗糖30g·L^-1+瓊脂6.5g·L^-1，
pH值為5.6～6.0，培養條件為：溫度20℃，每天光照12小時，光
照強度為1200lx；
(3)愈傷組織分化鱗莖：選取上述生長緊密的愈傷組織轉接入
鱗莖分化培養基中進行鱗莖分化培養，培養基的配制為：MS+6～
BA2.0mg·L^-1+NAA0.2～0.3mg·L^-1+蔗糖30g·L^-1+瓊脂6.0g·L^-1，
pH值為5.6～6.0，培養條件為：溫度20℃，每天光照12小時，光
照強度為1000lx；
(4)鱗莖的生長：切取(3)步驟誘導產生的小鱗莖以2～4個為
一組接入到鱗莖生長培養基pH值為5.6～6.0，MS+6-BA2.0
mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1中，待鱗莖長至所需體積后即可收獲，培養
條件為：溫度22℃，每天光照12小時，光照強度為1500lx。
2.根據權利要求1所述的一種以川貝母植株葉為外植體的鱗莖
快速增殖方法，其特征在于：上述(1)步驟中所述的川貝母植株葉為
組培苗幼葉。
3.根據權利要求1或2所述的一種以川貝母植株葉為外植體的
鱗莖快速增殖方法，其特征在于：上述(2)步驟中所述愈傷組織按
35g培養基中接入2g的比例接入增殖培養基中。
4.根據權利要求1或2所述的一種以川貝母植株葉為外植體的
鱗莖快速增殖方法，其特征在于：上述(3)步驟中愈傷組織接入在分
化培養基中，其插入部分的長度占整個長度的3/5。