本發明提供了一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，所述的蛋白酶缺失微生物是枯草芽孢桿菌WB800，包括以下步驟：S1：將所述枯草芽孢桿菌WB800接種于活化培養基平板，置于培養箱內倒置培養以活化菌株；S2：挑取步驟S1活化后的單菌落接種于種子培養基，置于搖床震蕩培養至種子液的OD達到0.6~1.0；S3：將步驟S2中的種子液接入發酵培養基中，置于搖床震蕩培養；S4：將步驟S3發酵后的產物進行離心，收集上清液，獲得殼聚糖酶的粗酶液。本發明采用的枯草芽孢桿菌WB800屬于微生物發酵和酶工程技術領域長期使用的安全菌株，無毒無害；另外，發酵周期短，發酵液殼聚糖酶活力達到45U/mL，離心分離獲得的粗酶液可直接應用于殼寡糖的生產。

1.一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，所述的蛋白酶缺失微生物是枯草芽孢桿菌WB800，保藏于江南大學中國高校工業微生物資源和信息中心，CICIM編號為B0132，其特征在于，所述方法包括以下步驟：S1：菌種活化將所述枯草芽孢桿菌WB800接種于活化培養基平板，置于培養箱內倒置培養以活化菌株；S2：種子培養挑取步驟S1活化后的單菌落接種于種子培養基，置于搖床震蕩培養至種子液的OD600達到0.6～1.0；S3：發酵產酶將步驟S2中的種子液接入發酵培養基中，置于搖床震蕩培養；所述發酵培養基的配方為：殼寡糖20～30g/L，胰蛋白胨9～11g/L，酵母提取物4～6g/L，氯化鈉9～11g/L，用氫氧化鈉調節所述發酵培養基的pH，使其達到7.2～7.6；且所述殼寡糖是聚合度為2～10的殼聚糖部分水解的產物；S4：離心分離將步驟S3發酵后的產物進行離心，收集上清液，獲得殼聚糖酶的粗酶液。2.根據權利要求1所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于：所述種子液按體積百分比1.5～3％的接種量接入所述發酵培養基中。3.根據權利要求1所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于，步驟S1中所述活化培養基的配方為：胰蛋白胨8～12g/L，酵母提取物3～7g/L，氯化鈉7～11g/L，瓊脂粉15～20g/L，用氫氧化鈉調節所述活化培養基的pH為7.2～7.6。4.根據權利要求1所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于，步驟S2中所述種子培養基的配方為：胰蛋白胨8～12g/L，酵母提取物3～7g/L，氯化鈉7～11g/L，用氫氧化鈉調節所述種子培養基的pH，使其達到7.2～7.6。5.根據權利要求1～4中任意一項權利要求所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于：步驟S1中，所述菌種活化的培養溫度為35～39℃，時間為12～24h。6.根據權利要求1～4中任意一項權利要求所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于：步驟S2中，所述種子培養的溫度為35～39℃，時間為12～16h，轉速為180～220r/min。7.根據權利要求1～4中任意一項權利要求所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于：步驟S3中，所述發酵產酶的溫度為35～39℃，時間為25～30h，轉速為180～220r/min。8.根據權利要求1～4中任意一項權利要求所述的一種利用蛋白酶缺失微生物生產殼聚糖酶的方法，其特征在于：步驟S4中，所述離心分離的時間為10～20min，轉速為3000～5000r/min。