本發(fā)明公開了一種雙孢蘑菇菌種的液體發(fā)酵培養(yǎng)方法，包括：（1）取活化的0.5cm斜面母種接種到裝有60～120mL液體培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)瓶中，控溫21～27℃，90～180rpm振蕩培養(yǎng)5～7d得一級(jí)搖瓶菌種，按接種量為5～10%轉(zhuǎn)接一級(jí)種子到二級(jí)培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，再將培養(yǎng)好的二級(jí)搖瓶液體菌種轉(zhuǎn)接到三級(jí)液體培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，相同方法依次進(jìn)行各級(jí)培養(yǎng)得種子液；（2）將種子液按5%的接種量接種至裝有6L發(fā)酵培養(yǎng)基的10L發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，25℃培養(yǎng)5～6d即可。該方法生產(chǎn)周期短、菌齡一致、生產(chǎn)成本低、接種簡(jiǎn)便，一支試管種通過五級(jí)種培養(yǎng)就可以放大200000倍，液體二級(jí)菌種生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于固體傳統(tǒng)栽培種，速度提高了33%，同時(shí)，液體種各級(jí)之間的生長(zhǎng)速度并沒有太大差異，平均滿瓶時(shí)間是27.5d，完全可以在工廠生產(chǎn)中實(shí)際應(yīng)用。

1.一種雙孢蘑菇菌種的液體發(fā)酵培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）取活化的0.5cm²斜面母種接種到裝有60～120mL液體培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)瓶中，控溫
21～27℃，90～180rpm振蕩培養(yǎng)5～7d得一級(jí)搖瓶菌種，按接種量為5～10%轉(zhuǎn)接一級(jí)種子到二
級(jí)培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，再將培養(yǎng)好的二級(jí)搖瓶液體菌種轉(zhuǎn)接到三級(jí)液體培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，相同
方法依次進(jìn)行各級(jí)培養(yǎng)得種子液；其中，各級(jí)搖瓶培養(yǎng)條件相同：裝液量為90mL，控溫
25℃，150rpm振蕩培養(yǎng)5～6d，接種量為5%；液體培養(yǎng)基配方為：碳源，氮源10～20g，
KH₂PO₄1～3g，MgSO₄0.5～1.5g，VB₁10mg，水1000mL，pH5～7；碳源為20～30mL麥芽
汁；氮源為玉米粉；碳氮比為3:1或2.5:1.5；
其中，一級(jí)培養(yǎng)時(shí)，液體培養(yǎng)基配方為：麥芽汁30mL，玉米粉10g，KH₂PO₄1g，MgSO₄
0.5g，VB₁10mg，水1000mL，pH6.5；
二級(jí)培養(yǎng)時(shí)，液體培養(yǎng)基配方為：玉米粉10g，蛋白胨20g，KH₂PO₄1g，MgSO₄0.5g，
VB₁10mg，水1000mL，pH6.5；
（2）將步驟（1）所得的種子液按5%的接種量接種至裝有6L發(fā)酵培養(yǎng)基的10L發(fā)酵罐進(jìn)行
發(fā)酵培養(yǎng)，25℃培養(yǎng)5～6d，即可；其中，發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：麥麩30g，玉米粉10g，蛋白
胨1g，磷酸二氫鉀0.5g、硫酸鎂1g、VB₁10mg/L，水1000mL，pH6.5。