本發明公開了一種納塔櫟體細胞胚胎的發生方法，包括選材、消毒處理、試管芽苗誘導培養、體胚誘導、增殖培養、成熟培養、體胚的萌發一系列操作；在體胚誘導、增殖、成熟、萌發培養的培養基中進行培養。本發明具有繁殖系數高，繁殖時間不受季節限制，取材對母體傷害小，無病蟲害困擾，能夠保持原植株優良性狀，在納塔櫟苗木生產及科研中均具有重要的應用價值。

1.一種納塔櫟體細胞胚胎的發生方法，其特征在于：包括以下步驟：?(1)選材：選取9年生納塔櫟優選單株的當年生萌條，將其剪成4～6cm的帶芽小段；?(2)對帶芽小段外植體進行消毒處理；?(3)芽誘導培養：在無菌條件下，將步驟(2)中的外植體用剪刀去除莖段頭尾氧化變黑部分，分清形態學上、下端，剪成長1.5～3cm的Y字型，下端切口呈斜型，豎直接種于芽誘導培養基中培養15～20d，分化長成無菌芽苗；所述芽誘導培養基的配方為：WPM基本培養基，附加0.05～0.08mg·L^-16-BA、0.05～0.06mg·L^-1NAA、25～40g·L^-1蔗糖、6.5～7.0g·L^-1卡拉膠，調pH值為5.7～5.8；?(4)體胚誘導：將步驟(3)中長成的無菌苗嫩葉接種到體胚誘導培養基中培養15～30d；MS基本培養基，附加0.16～0.20mg·L^-16-BA、0.2～0.3mg·L^-1NAA、0.08～0.12mg·L^-12,4-D、25～40g·L^-1蔗糖、6.5～7.0g·L^-1卡拉膠，調pH值為5.7～5.8；?(5)體胚增殖培養：將步驟(4)中誘導產生的體胚，進行增殖培養，20～25d后，體胚迅速增殖呈白色或黃色透明顆粒狀；體胚增殖培養基配方為：MS基本培養基，附加1.8～2.0mg·L^-16-BA、0.01～0.03mg·L^-1NAA、25～40g·L^-1蔗糖、6.5～7.0g·L^-1卡拉膠，調pH值為5.7～5.8；?(6)成熟培養：將步驟(5)中增殖獲得的體胚，接種于含有成熟培養基的培養瓶中培養30～50d；體胚成熟培養基配方為：MS基本培養基，附加40～60g·L^-1蔗糖、6.5～7.0g·L^-1卡拉膠，調pH值為5.7～5.8；?(7)體胚的萌發：將步驟(6)中獲得的成熟體胚接種于萌發培養基中培養40～60d進行植株再生；所述體胚萌發培養基配方為：MS基本培養基，附加8～12g·L^-1山梨醇、20～30g·L^-1蔗糖、6.5～7.0g·L^-1卡拉膠，調pH值為5.7～5.8；所述的WPM基本培養基即木本植物培養基的具體配方如下：?2.根據權利要求1所述的納塔櫟體細胞胚胎的發生方法，其特征在于：所述步驟(2)中的消毒處理過程包括：將采集的枝條去除2/3葉片后修剪成約4～6cm長的帶腋芽莖段，洗滌劑浸泡30min，流水沖洗10次，蒸餾水清洗外植體后，用無菌水沖洗3～4次，置于無菌燒杯中，在超凈工作臺內用70％的酒精浸泡30s，無菌水沖洗2～3次，再用0.1％升汞溶液消毒3min，最后用無菌水沖洗6次；所述步驟(3)、步驟(4)、步驟(5)、步驟(6)和步驟(7)中的培養條件為：光照強度為1600～2500lx，每日光照時間為16h，溫度為(25±2)℃。?3.根據權利要求1中一項所述的納塔櫟體細胞胚胎的發生方法，其特征在于：所述的MS基本培養基的具體配方如下：?