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一種海倫兜蘭無菌播種快速繁殖方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-16
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610966615.9 
  • 技術(專利)名稱 一種海倫兜蘭無菌播種快速繁殖方法 
  • 項目單位 中國科學院華南植物園
  • 發明人 曾宋君,鄧瑩,吳坤林,鄭楓,張建霞,張新華,馬國華,段俊 
  • 行業類別 中藥材獲取-非動植物采選
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王澤銘
  • 發布時間 2022-01-16  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種海倫兜蘭無菌播種快速繁殖方法。本發明以合適胚齡的種子作為外植體,在獨特的培養基上進行無菌播種、原球莖的分化、原球莖的增殖和壯苗培養,在短時間內生產出大量優質的海倫兜蘭種苗。本發明的方法具有種子萌發率高、出苗快、種苗品質好等優點,海倫兜蘭種苗可用于供應市場并應用于遷地保護和自然回歸,有利于海倫兜蘭的資源保護和可持續利用。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種海倫兜蘭無菌播種快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步驟:
    a、人工授粉和種子的獲得:選擇生長健壯的海倫兜蘭(Paphiopedilum helenae
    Aver.)母株進行異株人工授粉,選擇授粉后120~180天的粉末狀種子作為外植體進行無菌
    播種;
    b、外植體消毒和無菌播種:將授粉后120~180天的蒴果進行消毒處理,切開果實,將粉
    末狀種子接種到種子萌發培養基上培養,培養溫度25℃~30℃,光照度1500~2000勒克斯,
    光照時間12~16小時/天,胚萌發形成原球莖;所述的種子萌發培養基為:每升含有椰子汁
    50~100毫升、萘乙酸0.1~0.5毫克、活性炭1.0~2.0克、蔗糖30克、瓊脂6~7克,其余為1/
    4MS培養基,pH 5.8~6.0;
    c、類原球莖的誘導和增殖:將步驟b得到的原球莖接種到類原球莖的誘導和增殖的培
    養基上培養,培養溫度25℃~30℃,光照度1500~2000勒克斯,光照時間12~16小時/天,獲
    得類原球莖,將類原球莖接種到新的類原球莖的誘導和增殖的培養基上進行增殖培養,培
    養溫度25℃~30℃,光照度1500~2000勒克斯,光照時間12~16小時/天,類原球莖大量增
    殖;所述的類原球莖的誘導和增殖的培養基為:每升含有6-芐基腺嘌呤5.0~10.0毫克、激
    動素5.0~10.0毫克、萘乙酸1.0~2.0毫克、椰子汁100~200毫升、蛋白胨1~2克、蔗糖30
    克、瓊脂6~7克,其余為1/2MS培養基,pH 5.8~6.0;
    d、類原球莖的分化:將類原球莖接種到分化培養基上培養,培養溫度25℃~30℃,光照
    度1500~2000勒克斯,光照時間12~16小時/天,類原球莖分化出小苗;所述的分化培養基
    為:每升含有6-芐基腺嘌呤0.2~1.0毫克、萘乙酸1.0~2.0毫克、椰子汁100~200毫升、蛋
    白胨1~2克、活性炭1.0~2.0克、蔗糖30克、瓊脂6~7克,其余為1/2MS培養基,pH 5.8~
    6.0;
    e、壯苗培養:將小苗接種到壯苗培養基上培養,培養溫度25℃~30℃,光照度1500~
    2000勒克斯,光照時間12~16小時/天,獲得完整植株;所述的壯苗培養基為:每升含有花寶
    1號1~2克、花寶2號1~2克、MS培養基的維生素和肌醇成分、萘乙酸1.0~2.0毫克、椰子汁
    100~200毫升、蛋白胨1~2克、香蕉勻漿50~150克、活性炭1.0~2.0克、蔗糖30克、瓊脂6~
    7克,余量為水,pH 5.8~6.0;
    f、試管苗移栽:將完整植株在自然光下煉苗10~15天,然后取出植株洗凈根部的培養
    基,移栽到植金石、松樹皮和泥炭土按質量比2~3:2~3:1混合的栽培基質中培養獲得海倫
    兜蘭種苗。
    2.根據權利要求1所述的海倫兜蘭無菌播種快速繁殖方法,其特征在于,步驟b所述的
    將授粉后120~180天的蒴果進行消毒處理具體為:將蒴果用體積分數70%~80%的酒精浸
    泡30~60秒后,用質量分數0.1%~0.2%的升汞溶液消毒10~20分鐘,無菌水漂洗4~5次。
    展開

專利技術附圖

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