1.一種海膽抗菌肽的制備方法,其特征為,其制備過程如下:(1).構建分泌型重組酵母表達菌株:根據海膽抗菌肽的氨基酸序列設計出海膽抗菌肽的基因序列,所述的海膽抗菌肽的基因序列為:atg?tgg?aat?cca?ttt?aga?aaa?ttg?tat?aga?aaa?gaa?tgt?aat?gat?gtt?act?tct?tgt?gat?act?gtt?tct?ggt?gtt?aaa?act?tgt?act?aaa?aaa?aat?tgt?tgt?cat?aga?aaa?ttt?ttt?ggt?aaa?act?att?ttg?aaa?gct?cca?gaa?tgt?act?gtt?att?tct?aaa?aaa?aaa?aaa?aaa?aaa?tga,選用畢赤酵母的偏嗜密碼子,通過SOE法合成海膽抗菌肽的基因片段,所述基因全長為180bp;將海膽抗菌肽的基因片段克隆入pPICZ?α-A質粒,從而得到分泌型重組酵母的表達載體pPICZ?α-A-SK,將表達載體pPICZ?α-A-SK通過電擊法轉入畢赤酵母中,構建得到分泌型重組酵母表達菌株;(2).培養分泌型重組酵母表達菌株:將構建得到的分泌型重組酵母表達菌株加入BMMY培養基中進行搖瓶培養,每24h補加培養基體積2%的甲醇,培養時搖床轉速為200-250r/min,培養溫度為29℃,培養72h后,海膽抗菌肽即可獲得高效表達,分泌到發酵液中;通過以上方法制得的海膽抗菌肽,其氨基酸序列為:Met?Trp?Asn?Pro?Phe?Arg?Lys?Leu?Tyr?Arg?Lys?Glu?Cys?AsnAsp?Val?Tyr?Ser?Cys?Asp?Tyr?Val?Ser?Gly?Val?Lys?Tyr?Cys?Tyr?LysLys?Asn?Cys?Cys?His?Arg?Lys?Phe?Phe?Gly?Lys?Tyr?Ile?Leu?Lys?Ala?Pro?Glu?Cys?Tyr?Val?Ile?Ser?Lys?Lys?Lys?Lys?Lys?Lys。
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