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直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-19
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200910040265.3 
  • 技術(專利)名稱 直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法 
  • 項目單位 華南理工大學
  • 發明人 劉冬梅,吳暉,湯石生,邢蕾 
  • 行業類別 中藥材獲取-動植物采集
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛茹梅
  • 發布時間 2021-09-19  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉及其制備方法。該方法將干酪乳桿菌鼠李糖亞種經過“兩步法”擴大培養,盡量使細胞處于同步生長時期,然后在生產培養基中,用NaOH溶液在線控制pH為6.0~6.8,于35℃~37℃培養16h~24h,離心后收集菌泥,加入保護劑溶液,于-40℃~-65℃下預凍0.5h~2.0h,使其在容器壁上厚度為5~15mm,干燥制成直投式凍干粉。該凍干粉的活菌數達10~10cfu/g,并具有復水性好、色澤好、流動性好、易于貯運、方便生產等特點。用該凍干粉可直接用于發酵生產醬腌菜、香腸、酸奶、L-乳酸、玉米粉、豆粕、花生粕和用作益生菌制劑等。
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  • 02

    說明書

    1.一種直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于包括如下步驟和工藝條件:第一步將干酪乳桿菌鼠李糖亞種的凍干粉置于MRS培養基中,于28~30℃靜止培養24h~36h,制成母發酵劑;以重量份數計,所述MRS培養基配方為:蛋白胨0.8~1.0份,酵母抽提物0.5~0.7份,葡萄糖1.5~2.0份,檸檬酸二銨0.1~0.2份,硫酸鎂0.048~0.058份,牛肉膏0.5~1.0份,磷酸氫二鉀0.1~0.2份,硫酸錳0.015~0.025份,乙酸鈉0.4~0.5份,吐溫800.1~0.3份,蒸餾水94.0~96.0份;攪拌溶解均勻后用0.08~0.10MPa滅菌15~20min,冷卻至28~30℃備用;所述的干酪乳桿菌鼠李糖亞種保藏于中國工業微生物菌種保藏管理中心,編號為CICC?6013,命名為Lactobacillus?casei?subsp.rhamnosus?6013;第二步以體積比為2~5∶100的比例,將母發酵劑接入工作發酵劑培養基中,于28~30℃靜止培養24h~36h,制成工作發酵劑;以重量份數計,所述工作發酵劑培養基配方為:蛋白胨0.8~1.0份,酵母抽提物0.5~0.7份,葡萄糖1.5~2.0份,檸檬酸二銨0.1~0.2份,硫酸鎂0.048~0.058份,牛肉膏0.5~1.0份,磷酸氫二鉀0.1~0.2份,硫酸錳0.015~0.025份,乙酸鈉0.4~0.5份,吐溫800.1~0.3份,番茄汁6.0~8.0份,胡蘿卜汁4.5~6.0份,抗壞血酸0.02~0.04份和蒸餾水79.8~85.4份;攪拌溶解均勻后用0.08~0.10MPa滅菌15~20min,冷卻至28~30℃備用;第三步以體積比為2~5∶100的比例,將工作發酵劑接入生產培養基中,于35~37℃下的發酵罐中進行培養,在培養過程用NaOH溶液調整pH為6.0~6.8,攪拌轉速為100~150rpm,培養16~24h后收集,得發酵菌懸液;以重量份數計,所述生產培養基配方組成為:蛋白胨2.5~3.0份,酵母抽提物0.5~0.7份,葡萄糖1.5~2.0份,檸檬酸二銨0.1~0.2份,硫酸鎂0.048~0.058份,牛肉膏0.5~1.0份,磷酸氫二鉀0.1~0.2份,硫酸錳0.015~0.025份,乙酸鈉0.4~0.5份,吐溫800.1~0.3份,番茄汁6.0~8.0份,胡蘿卜汁4.5~6.0份,抗壞血酸0.02~0.04份,蒸餾水78.0~83.7份;攪拌溶解均勻后用0.08~0.10MPa滅菌15~20min,冷卻至35~37℃備用;第四步將發酵菌懸液于5000~8000rpm,離心20~25min,舍棄上清液,收集菌泥;第五步在菌泥中,按復合保護劑溶液的生理鹽水溶液與菌泥的體積比為3~5∶1加入復合保護劑溶液,混合均勻為保護劑懸浮液;以重量份數計,所述的復合保護劑溶液配方組成為:海藻糖5~10份,脫脂奶粉5~10份,氯化鈉0.9份,蒸餾水79.1~89.1份,溶解后攪拌均勻,用0.08~0.10MPa滅菌15~20min,冷卻至常溫備用;第六步將保護劑懸浮液置于淺盤中,在于-40℃~-65℃下預凍0.5h~2.0h,使保護劑懸浮液厚度為5~15mm;第七步將第六步所得的保護劑懸浮液置于真空冷凍干燥機中,于冷阱溫度為-40℃~-65℃,真空度為1.3~13.0Pa,干燥18~20h,得凍干粉,凍干粉水分重量含量低于3%,活菌數達到1011~1012cfu/g;第八步用濕度為50~60%的恒濕空氣將凍干粉的溫度恢復到常溫,在濕度為50~60%的環境中,用氣流包裝機進行鋁塑包裝,氣流分裝機所用的無菌干燥空氣的濕度不應高于20%。2.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:第三步工作發酵劑與生產培養基的體積比為3∶100。3.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:所述第三步中NaOH溶液的濃度為1~2mol/L。4.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:所述第三步中pH為6.8。5.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:所述第五步中海藻糖為10份,脫脂奶粉為10份,氯化鈉為0.9份。6.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:第一步或第二步的發酵溫度為30℃,培養時間為24h。7.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:所述第三步發酵溫度為37℃。8.根據權利要求1所述的直投式干酪乳桿菌鼠李糖亞種凍干粉的制備方法,其特征在于:第六步的淺盤厚度為40~50mm。
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專利技術附圖

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