本發(fā)明屬于羽絨制品中動物源性成分的定性檢測技術(shù)，具體地說是檢測纖維制品中羊駝成分的引物/探針組。本發(fā)明選取羊駝毛的線粒COXⅠ基因序列，設(shè)計一組特異性引物和探針。使用該引物和探針，采用實時熒光PCR技術(shù)，可快速、靈敏、特異地檢測纖維制品中的羊駝成分。該引物和探針也可以試劑盒的形式和其他試劑一起提供，用于核酸擴增反應。該法操作簡便、重復性好。

1.羊駝毛成分的實時熒光PCR檢測方法，其特征在于：
上游引物：5’- GCTTATTTTACATCCGCCACAA -3’
下游引物：5’- ACCTCCTACGGTGAACAGGAA -3’
探針：5’- CAACATTAAATGATCCCCCG -3’；
所述探針為TaqMan探針，其5’端標記有報告熒光基團，3’端有淬滅熒光基團；
所述引物和探針應用于羊駝毛成分的PCR檢測，其體積比為：上游引物：下游引物：探針
=1：1：1；其檢測過程如下：
（1）待檢樣品DNA的提取
采用普通酚-氯仿抽提法或使用DNA提取試劑盒提取羊駝毛的DNA；
（2）羊駝毛成分的實時熒光PCR擴增
A．在反應管中加入Premix Ex Taq 2× 12.5μL，10μM上游引物1μL，10μM下游引物1μL，
5μM探針1μL，DNA 2μL，dH₂O 7.5μL，總體25μL；
B．將PCR反應管放入熒光定量PCR儀，按下述反應條件完成PCR擴增：
95℃ 30sec，1個循環(huán)，95℃ 5sec，60℃ 30sec，40個循環(huán)，PCR擴增；陰性對照反應時，
加入RNase free dH₂O替代DNA模板；陽性反應時，做2個平行樣；
（3）應用熒光定量PCR儀隨機軟件，分析擴增結(jié)果
反應結(jié)束后，設(shè)置無效基線范圍；基線范圍選擇在3～15個循環(huán)，閾值設(shè)置原則以基線
剛好超過正常陰性對照擴增曲線的最高點，且Ct值=40為準，設(shè)置閾值后，分析樣品的檢測
結(jié)果；
待測樣品羊駝毛成分檢測Ct值大于或等于40，陰性對照、陽性對照和空白對照結(jié)果正
常者，則可判定該樣品未檢出羊駝毛成分；
待測樣品羊駝成毛分檢測Ct值小于或等于36，陰性對照、陽性對照和空白對照結(jié)果正
常者，則可判定該樣品檢出羊駝毛成分。