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四鏈體DNA和雙鏈體探針系統

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-30
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN01817230.X 
  • 技術(專利)名稱 四鏈體DNA和雙鏈體探針系統 
  • 項目單位 英詹尼斯公司
  • 發明人 亞斯曼·I·戴克斯,格倫·H·埃里克森 
  • 行業類別 醫療器械-診斷設備
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 陳詠艷
  • 發布時間 2022-01-30  
  • 01

    項目簡介

    如核酸四鏈體的多鏈體結構包括:含有核堿基第一序列的第一鏈;含有核堿基第二序列的第二鏈,其中第二鏈與第一鏈通過沃森一克里克鍵合相連;含有核堿基第三序列的第三鏈;以及含有核堿基第四序列的第四鏈,其中第四鏈與第二鏈和第三鏈通過沃森一克里克鍵合相連。多鏈體結構的形成受到單價陽離子(例如鈉和鉀)、二價陽離子、多價陽離子、嵌入劑和/或已知在核酸小溝內結合的分子的促進。多鏈體結構及其形成方法具有診斷、治療、預防和納米工程的用途。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種多鏈體結構,其包括:第一鏈,其含有核堿基第一序列;第二鏈,其含有核堿基第二序列,其中所述第二鏈與所述第一鏈通過沃森-克里克鍵合相連;第三鏈,其含有核堿基第三序列;以及第四鏈,其含有核堿基第四序列,其中所述第四鏈與所述第二鏈和所述第三鏈通過沃森-克里克鍵合相連,以及其中所述核堿基第四序列的至少一個核堿基通過沃森-克里克鍵合與所述核堿基第三序列的至少一個核堿基相連以及與所述核堿基第二序列的至少一個核堿基相連。2.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述多鏈體結構是分離、純化、人工或合成的四鏈體。3.權利要求1所述的多鏈體結構,其中各個所述鏈獨立地包含核酸或核酸類似物。4.權利要求3所述的多鏈體結構,其中各個所述鏈獨立地包含DNA或RNA。5.權利要求3所述的多鏈體結構,其中各個所述鏈獨立地包括含有不帶電荷或帶部分電荷的主鏈的核酸類似物。6.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第二鏈或所述第四鏈中的一種包含DNA,而所述第二鏈或所述第四鏈中的另一種包含RNA、mRNA、hnRNA、rRNA、tRNA或cDNA。7.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第二鏈和第四鏈相互反平行。8.權利要求7所述的多鏈體結構,其中將所述第一鏈和所述第二鏈的大溝放置于所述第三鏈和所述第四鏈的大溝中。9.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第二鏈和所述第四鏈相互平行。10.權利要求9所述的多鏈體結構,其中將所述第一鏈和所述第二鏈的大溝放置于所述第三鏈和所述第四鏈的小溝中。11.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第二序列和所述第四序列中的各個核堿基與其他2個核堿基結合。12.權利要求1所述的多鏈體結構,其中沒有一條鏈與另一條鏈相鄰。13.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述多鏈體結構不含有Hoogsteen鍵合。14.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述多鏈體結構不含有G-G四聯體。15.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第一鏈和所述第二鏈的長度為5-50個堿基對。16.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第三鏈和所述第四鏈為基因組DNA。17.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第三鏈和所述第四鏈包括基因組DNA中的單元型。18.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第三鏈和所述第四鏈為PCR擴增的產物。19.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述多鏈體結構不含有固相支持物。20.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述多鏈體結構與固相支持物結合。21.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述固相支持物不是電傳導的。22.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述固相支持物是電傳導的。23.權利要求1所述的多鏈體結構,其進一步包括與所述第一鏈、所述第二鏈、所述第三鏈和所述第四鏈中的至少一種相結合的治療劑、預防劑或診斷劑。24.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第一鏈和所述第二鏈的長度各為5-30個堿基以及所述第三鏈和所述第四鏈的長度各為8到3.3×109個堿基對。25.權利要求1所述的多鏈體結構,其中所述第四序列含有任意順序的25%-75%的嘌呤堿基和75%-25%的嘧啶堿基。26.一種提供權利要求1所述的多鏈體結構的方法,所述方法包括:提供雜交介質,其包含所述第一鏈、所述第二鏈、所述第三鏈、所述第四鏈、水、緩沖液和至少一種促進劑;以及將所述雜交介質溫育,溫育時間能有效使所述第二鏈與所述第四鏈雜交以提供所述多鏈體結構。27.權利要求26所述的方法,其中所述雜交介質被緩沖至pH為5到9。28.權利要求26所述的方法,其中所述至少一種促進劑是嵌入劑。29.權利要求28所述的方法,其中所述至少一種促進劑是嵌入熒光團,以及含有所述多鏈體結構的測試介質的熒光強度與所述第二鏈對所述第四鏈的結合親合力正相關。30.權利要求29所述的方法,其中所述嵌入熒光團選自YOYO-1、TOTO-1、溴化乙錠、乙錠同型二聚體-1、乙錠同型二聚體-2和吖啶。31.權利要求26所述的方法,其中所述至少一種促進劑被限制于所述第一鏈、所述第二鏈、所述第三鏈和所述第四鏈中的至少一種的范圍內。32.權利要求26所述的方法,其中所述至少一種促進劑為單價陽離子。33.權利要求26所述的方法,其中所述至少一種促進劑為一價以上的陽離子。34.權利要求33所述的方法,其中所述陽離子選自堿金屬陽離子、堿土金屬陽離子、過渡金屬陽離子、Co(NH3)6+3、三價亞精胺和四價精胺中的至少一種。35.權利要求33所述的方法,其中所述陽離子是以濃度50mM-125mM提供的K+或Na+。36.權利要求26所述的方法,其中在所述第一鏈和所述第二鏈前將所述第三鏈和所述第四鏈提供在所述雜交介質中,以及其中所述第一鏈和所述第二鏈在通過與所述雜交介質接觸再水合前以去水化形式提供。37.權利要求26所述的方法,其中所述溫育時間不多于2小時。38.權利要求26所述的方法,其中所述溫育在室溫下進行。39.權利要求26所述的方法,其中所述第二鏈與所述第四鏈的雜交以熒光、化學發光、電化學發光或電信號的變化來進行檢測。40.權利要求39所述的方法,其中所述信號的強度與所述第二鏈和所述第四鏈之間的結合親合力相關。41.權利要求40所述的方法,其中所述第一鏈和所述第二鏈中的至少一種用非嵌入熒光團共價標記,以及所述強度與所述結合親合力負相關。42.權利要求41所述的方法,其中所述非嵌入熒光團選自生物素、羅丹明和熒光素。43.權利要求41所述的方法,其中所述方法是無需在所述第一,第二,第三或第四鏈上提供信號猝滅劑所進行的均一分析。44.權利要求26所述的方法,其中所述第二鏈與所述第四鏈的雜交使與所述第三鏈和所述第四鏈中的至少一種相關的活性失活。45.權利要求26所述的方法,其中所述第一鏈和所述第二鏈中的至少一種進一步包含藥劑,以及其中所述第二鏈與所述第四鏈的雜交將所述藥劑放置在所述第三鏈、所述第四鏈或與所述第三鏈和所述第四鏈中的至少一種相連的另一種分子上的靶的有效距離內。46.權利要求45所述的方法,其中所述藥劑選自設計成與臨床上相關基因的啟動子序列結合的核酸、設計成與臨床上相關基因結合的核酸或設計成與病原體復制位點的起點結合的核酸。47.權利要求26所述的方法,其中所述第一鏈和所述第二鏈與所述第三鏈和所述第四鏈的比例約為10∶1。48.權利要求26所述的方法,其中所述第一鏈、所述第二鏈、所述第三鏈和所述第四鏈的濃度各為不大于5×10-10M。49.權利要求26所述的方法,其中所述至少一種促進劑為小溝核酸結合分子,其以非嵌入方式結合以及結合的締合常數為至少103M-1。50.權利要求1所述的多鏈體,其中所述第一鏈與所述第三鏈通過沃森-克里克鍵合相連。51.一種分析結合的方法,所述方法包括:提供靶核酸或具有靶序列的核酸類似物,其中所述靶序列含有至少一個嘌呤堿基和至少一個嘧啶堿基;提供包含核酸序列或核酸類似物序列的雙鏈探針;提供雜交促進劑;向介質中加入所述探針、所述靶和所述雜交促進劑以提供含有包括與所述靶序列結合的所述探針的權利要求1的多鏈體結構的測試樣品;用激發輻射照射所述測試樣品以誘發測試樣品發射熒光輻射;檢測所述熒光輻射的強度,其中所述強度與所述探針和所述靶序列之間的結合親合力相關;以及從所述強度中確定所述探針和所述靶序列之間匹配的程度。
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