本發(fā)明解決所述大腸桿菌電化學(xué)傳感器的技術(shù)方案是，通過(guò)在玻碳電極表面的羧基化和生物偶聯(lián)技術(shù)將大腸桿菌連接在玻碳電極表面，制備大腸桿菌電化學(xué)傳感器。以玻碳電極為基底，先在其表面進(jìn)行氫氧化鈉蝕刻使其羧基化，然后將大腸桿菌偶聯(lián)在電極表面，其中偶聯(lián)劑為1?乙基?3?(3?二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和N?羥基琥珀酰亞胺(NHS)。其特征在于，獲得高靈敏度的大腸桿菌電化學(xué)傳感器。這種傳感器穩(wěn)定性好，檢測(cè)靈敏度高，準(zhǔn)確性好，其檢測(cè)效率明顯優(yōu)于傳統(tǒng)檢測(cè)方法。該制備方法包括：1.大腸桿菌段化學(xué)傳感器的制備；2.傳感器電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)。該傳感器制備方法簡(jiǎn)便，檢測(cè)靈敏度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，檢測(cè)速度快，便于實(shí)際應(yīng)用。

1.一種大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)玻碳電極的羧基化：將玻碳電極浸入一定濃度的氫氧化鈉溶液中，采用循環(huán)伏安法
在一定的掃描速度和范圍內(nèi)掃描1-100圈進(jìn)行電極表面羧基化；
(2)大腸桿菌的偶聯(lián)：先取一定體積的大腸桿菌溶液和一定體積的偶聯(lián)劑加入離心管
中，然后將羧基化后的玻碳電極置于管內(nèi)溶液中，在10～50℃下水浴0.1-5h，完成后將玻碳
電極取出，用0.01～1.0mol/L,pH為6.0～9.0的Tris-HCl緩沖液清洗電極表面，即完成了大
腸桿菌在電極表面的偶聯(lián)，從而得到大腸桿菌電化學(xué)傳感器，偶聯(lián)劑為1-乙基-3-(3-二甲
基氨丙基)碳二亞胺EDC和N-羥基琥珀酰亞胺NHS。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，所述傳感器
的電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)方法如下：采用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法進(jìn)行檢測(cè)，以玻碳電極作
為工作電極，鉑絲電極為對(duì)電極，飽和甘汞電極為參比電極，應(yīng)用電化學(xué)工作站表征不同濃
度大腸桿菌連接電極的差分脈沖伏安曲線；檢測(cè)底液均為Tris～HCl緩沖液，在一定的掃描
電位和掃描速度下進(jìn)行掃描，觀察峰型變化，記錄還原峰電流值。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，在步驟
(1)之前，還對(duì)玻碳電極表面進(jìn)行預(yù)處理，以去除玻碳電極表面的雜質(zhì)并進(jìn)行羧基化：先將
玻碳電極在粒徑為50nm的氧化鋁泥漿中拋光處理1-30min，然后在0.1-1.0mol/L硝酸，無(wú)水
乙醇和超純水中依次超聲清洗1-10min，最后用高純氮?dú)獯蹈呻姌O表面；處理干凈后的玻碳
電極在0.01-1.0mol/L硫酸溶液中通過(guò)電化學(xué)工作站進(jìn)行循環(huán)伏安法活化，符合要求后，在
超純水中浸泡備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，在步驟
(1)中，氫氧化鈉溶液為0.01～2mol/L，循環(huán)伏安法的掃描速度為10～200mV/s，掃描范圍
為-2～2V。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，在步驟
(2)中，取0.1～100μL大腸桿菌溶液和0.01～5mL EDC/NHS偶聯(lián)劑加入離心管。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大腸桿菌電化學(xué)傳感器的制備方法，其特征在于，在步驟(3)
中，采用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)底液均為0.01～1.0mol/L的Tris～
HCl緩沖液，pH為7.0～9.0，掃描電位-0.8～0.8V，掃描速度為10～100mV/s。
7.一種如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法制備的大腸桿菌電化學(xué)傳感器。