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一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑及其制造方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-16
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010297461.1 
  • 技術(專利)名稱 一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑及其制造方法 
  • 項目單位 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
  • 發明人 景志忠,陳國華,房永祥,竇永喜,蒙學蓮,趙娜,曾爽,賈懷杰,才學鵬 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 趙益川
  • 發布時間 2021-07-16  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種豬口蹄疫苗用的、由CpG基序和豬IFN-γ基因克隆入真核表達載體構成的佐劑及其制造方法,以及豬口蹄疫病毒滅活抗原疫苗與這種佐劑配伍而成豬口蹄疫苗組合物。本發明的這種復合分子型佐劑,其CpG基序為至少由3個GTCGTT、2個GACGTT和1個AACGTT特殊序列構成的一段基序,其序列為SEQ No:1,用其構建的PcDNA3.1重組質粒,并在大腸桿菌中增殖。
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  • 02

    說明書

    1.一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑,其特征在于這種佐劑是由CpG基序和豬IFN-γ基因克隆入真核表達載體構成的重組質粒,其中CpG基序和豬IFN-γ基因序列如SEQ?No:4所示。?2.一種制備權利要求1所述的一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑的方法,其特征在于人工設計、合成一段基本骨架由3個GTCGTT、2個GACGTT和1個AACGTT所構成的CpG基序以及其配對序列,同時在其末端分別設計EcoRI和Xho1酶切位點的部分堿基,并使其成為雙鏈DNA,其序列如SEQ?NO:1所示,通過基因重組方法構建到經EcoRI和Xho1酶切的真核表達載體pcDNA3.1中,獲得含CpG基序的pcDNA3.1-CpG重組質粒;然后以pGEM-T?easy-pIFN-γ重組質粒為模板,利用豬IFN-γ特異的上游引物:CCCAAGCTTACAATGGGTTATACAACTACTTATTTCT?Hind?III和下游引物:GGAATTCTTATTTTGATGCTCTCTGGCCT?EcoRI擴增獲得其基因,再分別將含CpG基序的pcDNA3.1-CpG重組質粒和IFN-γ基因經相應的酶酶切后連接,得到含SEQ?No:4的pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒。?3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于構建的pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒,先轉化大腸桿菌,用氨芐青霉素抗性篩選陽性克隆,提取重組質粒測序鑒定后,選擇高拷貝的陽性菌株,接種到含氨芐的LB培養基中大量增殖,擴增pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒,用SDS堿裂解法大量提取重組質粒DNA。?4.一種豬口蹄疫苗組合物,其特征在于豬口蹄疫病毒滅活抗原疫苗與權利要求1所述的分子型佐劑配伍而成。?
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