1.一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑,其特征在于這種佐劑是由CpG基序和豬IFN-γ基因克隆入真核表達載體構成的重組質粒,其中CpG基序和豬IFN-γ基因序列如SEQ?No:4所示。?2.一種制備權利要求1所述的一種豬口蹄疫苗用的復合分子型佐劑的方法,其特征在于人工設計、合成一段基本骨架由3個GTCGTT、2個GACGTT和1個AACGTT所構成的CpG基序以及其配對序列,同時在其末端分別設計EcoRI和Xho1酶切位點的部分堿基,并使其成為雙鏈DNA,其序列如SEQ?NO:1所示,通過基因重組方法構建到經EcoRI和Xho1酶切的真核表達載體pcDNA3.1中,獲得含CpG基序的pcDNA3.1-CpG重組質粒;然后以pGEM-T?easy-pIFN-γ重組質粒為模板,利用豬IFN-γ特異的上游引物:CCCAAGCTTACAATGGGTTATACAACTACTTATTTCT?Hind?III和下游引物:GGAATTCTTATTTTGATGCTCTCTGGCCT?EcoRI擴增獲得其基因,再分別將含CpG基序的pcDNA3.1-CpG重組質粒和IFN-γ基因經相應的酶酶切后連接,得到含SEQ?No:4的pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒。?3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于構建的pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒,先轉化大腸桿菌,用氨芐青霉素抗性篩選陽性克隆,提取重組質粒測序鑒定后,選擇高拷貝的陽性菌株,接種到含氨芐的LB培養基中大量增殖,擴增pIFN-γ-CpG?DNA重組質粒,用SDS堿裂解法大量提取重組質粒DNA。?4.一種豬口蹄疫苗組合物,其特征在于豬口蹄疫病毒滅活抗原疫苗與權利要求1所述的分子型佐劑配伍而成。?
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