本發明公開了一種人白細胞介素7在真核宿主中表達的方法，真核宿主為畢赤酵母X-33，主要包括以下步驟：(1)克隆人IL-7基因；(2)構建真核表達載體；(3)轉化重組載體到真核酵母宿主中；(4)酵母宿主中表達rIL-7蛋白。本發明改變傳統的用原核宿主大腸桿菌表達IL-7，探索出用真核宿主畢赤酵母來表達IL-7的方法，既保證了IL-7生物學活性，又獲得大量穩定的蛋白。

1.人白細胞介素7在真核宿主中表達的方法，其特征在于：真核宿主為畢赤酵母X-33，主要包括以下步驟：(1)克隆人IL-7基因：以人骨髓基質細胞提取總mRNA為模板，先用RT-PCR擴增出總cDNA，再以該cDNA為模板，用IL-7特異引物擴增出完整rhIL-7基因片段，所用IL-7特異引物中引入XhoI酶切位點和在末端XbaI酶切位點；回收PCR產物連接到質粒pMD20-T載體，得質粒rhIL-7/pMD20-T，經過測序確認為正確表達序列；(2)構建真核表達載體：將表達載體pPICZαB和質粒rhIL-7/pMD20-T經過XhoI和XbaI雙酶后純化回收，并用T4DNA連接酶于15-17℃連接15-17小時，得重組載體pPICZαB-IL7；(3)轉化重組載體到真核酵母宿主中：重組載體pPICZαB-IL7用SacI單酶切線性化后，用氯化鋰轉化方法轉化入畢赤酵母X-33宿主菌株中；經過抗性篩選得到陽性克隆；(4)酵母宿主中表達rIL-7蛋白：挑取含有陽性克隆的畢赤酵母X-33宿主菌株，用BMGY培養基培養至光密度值＞2.0，離心收集細胞沉淀，用1L?BMMY培養基重懸細胞并加入0.5％甲醇誘導，溫度在26-28℃繼續培養4天，每24小時補充甲醇使其中濃度保持0.5％，大量發酵表達IL-7蛋白，表達出的蛋白分泌在培養基中。2.根據權利1所述的方法，其特征在于：所述IL-7特異引物為5’GGCTCGAGATGTTCCATGTTTCTTTT?3’3’AGTCTAGATCAGTGTTCTTTAGTGCC?5’。