1.一種對微生物發酵法生產的N-乙酰神經氨酸進行分離提純的方法,其特征在于按如
下步驟進行:
a、以大腸桿菌發酵生產N-乙酰神經氨酸的發酵液為原料,加入蒙脫石粉進行菌體絮凝
沉淀,然后采用板框過濾器進行粗濾,對所得濾液進行離心分離,以去除發酵液中菌體,獲
得除菌發酵液;
b、在所述除菌發酵液中加入鹽酸,調節pH至3.0~5.0,再在80~90℃條件下加熱處理,
以使雜蛋白沉淀,離心分離,去除雜蛋白沉淀,獲得除蛋白發酵液;
c、利用活性炭或凹土對所述除蛋白發酵液吸附脫色,獲得脫色發酵液;
d、使用離子交換樹脂對所述脫色發酵液進行離子交換,去除所述脫色發酵液中的無機
鹽,獲得除鹽發酵液;
e、將所述除鹽發酵液進行減壓蒸發濃縮,然后在所得濃縮液中加入有機溶劑進行降溫
結晶,離心分離獲得晶體;
f、洗滌所述晶體,利用真空程序升溫干燥法對洗滌后晶體進行干燥,即完成對微生物
發酵法生產的N-乙酰神經氨酸的分離提純,獲得產物N-乙酰神經氨酸。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟a所述蒙脫石粉為鈣基蒙脫石;所述蒙
脫石粉的加入量為所述發酵液質量的10~20%。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟a所述板框過濾器中濾布孔徑大小為
1000~5000目。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟a所述的離心是通過管式高速離心機,
以不低于10000rpm的轉速進行離心,以使菌體沉淀。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟b所述的加熱處理的時間不少于0.5h,
以使雜蛋白徹底變性。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟c所述的活性炭或凹土的加入量為所
述除蛋白發酵液質量的1%~5%,所述的吸附溫度為20~50℃,所述吸附時間不少于0.5h。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟d所述離子交換樹脂為陽離子交換樹
脂。
8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于:所述陽離子交換樹脂為D001型陽離子交換
樹脂。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟e中所述濃縮液的濃度為100~200g/
L;所述有機溶劑為一元有機酸或一元醇和一元有機酸按體積比1:2~1:5構成的混合物;所
述有機溶劑的加入量為所述濃縮液體積的2~5倍;所述降溫結晶的溫度為2~30℃,結晶時
間為10~50h。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟f所述洗滌是以無水乙醇作為洗滌液
進行洗滌;步驟f所述干燥是通過程序升溫干燥法,在70~80℃真空烘干1~6h,再在80~90
℃真空烘干1~6h。
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