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一種制備L-天冬氨酸的方法

  • 專(zhuān)利類(lèi)型:發(fā)明專(zhuān)利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-30
  • 技術(shù)成熟度:通過(guò)中試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過(guò)戶(hù)
  • 交易成功

專(zhuān)利推薦

  • 技術(shù)(專(zhuān)利)類(lèi)型 發(fā)明專(zhuān)利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào) CN200910033457.1 
  • 技術(shù)(專(zhuān)利)名稱(chēng) 一種制備L-天冬氨酸的方法 
  • 項(xiàng)目單位 南京工業(yè)大學(xué)
  • 發(fā)明人 黃和,李霜,盛曉燕,付永前,高振 
  • 行業(yè)類(lèi)別 藥品-化學(xué)藥品
  • 技術(shù)成熟度 通過(guò)中試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 沈策略
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-09-30  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明公開(kāi)了一種利用富馬酸發(fā)酵液制備天冬氨酸酶以及L-天冬氨酸的方法。方法包括兩個(gè)部分,一是富馬酸發(fā)酵液的清液部分培養(yǎng)大腸桿菌生產(chǎn)天冬氨酸酶,二是利用發(fā)酵液的固體沉淀部分富馬酸鈣與硫酸銨反應(yīng)生成富馬酸銨,經(jīng)過(guò)濃縮后在天冬氨酸酶的作用下生成L-天冬氨酸。該種方法實(shí)現(xiàn)了以糖基路線生產(chǎn)L-天冬氨酸,實(shí)現(xiàn)了富馬酸發(fā)酵液全利用以至達(dá)到節(jié)能減排的目標(biāo),有效的降低了L-天冬氨酸的生產(chǎn)成本,減少了對(duì)環(huán)境的污染,使得L-天冬氨酸得到可持續(xù)的生產(chǎn),具有較廣的工業(yè)化生產(chǎn)前景。
    展開(kāi)
  • 02

    說(shuō)明書(shū)

    1.一種制備L-天冬氨酸的方法,其特征在于包括以下步驟:
    A、將微生物發(fā)酵法以葡萄糖為碳源,以CaCO3為中和劑,發(fā)酵米根霉得到的富馬
    酸發(fā)酵液的清液部分用于培養(yǎng)產(chǎn)天冬氨酸酶微生物的富集培養(yǎng)并產(chǎn)酶:
    (1)配制用于產(chǎn)天冬氨酸酶微生物的產(chǎn)酶培養(yǎng)基
    將發(fā)酵法以葡萄糖為碳源,以CaCO3為中和劑,發(fā)酵米根霉制備富馬酸工藝的清液
    部分,加入產(chǎn)天冬氨酸酶微生物培養(yǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),配制成產(chǎn)酶培養(yǎng)基;
    其中,所述的發(fā)酵米根霉制備富馬酸工藝的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖130g/L,尿
    素0.06g/L,KH2PO40.6g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,ZnSO4·7H2O0.0176g/L,
    FeSO47H2O?0.000498g/L,CaCO3為葡萄糖濃度的60%,pH為5.5;
    所述的產(chǎn)天冬氨酸酶培養(yǎng)基所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括:蛋白胨0~6g/L,牛肉膏0~4
    g/L,玉米干粉0~10g/L,硫酸鎂0~0.25g/L,硫酸二氫鉀0~0.5g/L,氯化鈉0~1g/L,
    pH7.0;
    (2)富集天冬氨酸酶微生物的培養(yǎng)
    取一環(huán)生長(zhǎng)良好的斜面種子于產(chǎn)酶培養(yǎng)基中,37℃,180r/min下恒溫?fù)u床培養(yǎng)12~
    16h得到種子液;將種子液以體積比10%接種量轉(zhuǎn)接到產(chǎn)酶培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),溫
    度37℃,通風(fēng)0.6~0.8vvm,攪拌轉(zhuǎn)速150r/min,培養(yǎng)14~16h,收獲菌體細(xì)胞;
    B、由富馬酸發(fā)酵液的沉淀部分制備得到富馬酸銨底物:
    按照富馬酸鈣與硫酸銨的摩爾比為1∶1.2~1∶1.5的比例,向富馬酸發(fā)酵液中的固體
    沉淀部分中加入硫酸銨,在80℃的條件下反應(yīng)1~2小時(shí),結(jié)束后過(guò)濾硫酸鈣、菌體細(xì)
    胞等固體物質(zhì)獲得富馬酸銨溶液,并將其濃縮至100~300g/L,加入氨水調(diào)整pH至8.5;
    C、酶催化反應(yīng)制備L-天冬氨酸:
    將發(fā)酵獲得的產(chǎn)天冬氨酸酶微生物細(xì)胞濕重按1%~5%的添加量加入到富馬酸銨底
    物中,置于溫度為30~37℃,攪拌轉(zhuǎn)速50~100r/min,轉(zhuǎn)化反應(yīng)3~5小時(shí),過(guò)濾除菌
    體,濾液中加入硫酸調(diào)pH至2.8~2.9,獲得L-天冬氨酸晶體。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備L-天冬氨酸的方法,其特征在于所述的產(chǎn)天冬氨
    酸酶微生物為大腸桿菌。
    展開(kāi)

專(zhuān)利技術(shù)附圖

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