1.一種溶瘤腺病毒重組載體，其特征在于，所述重組載體上同時攜帶有decorin基因表
達框及GM-CSF基因表達框；
所述表達框均插入在腺病毒基因組E1區中；
所述decorin基因表達框由CMV啟動子和decorin蛋白開放讀碼框序列組成；
所述重組載體上還包含腺病毒復制調控基因序列；
所述腺病毒復制調控基因序列包括端粒酶啟動子TERTp、腺病毒E1區復制起始基因E1A
和E1B55K；
從序列的5’至3’方向為：decorin基因表達框-腺病毒復制調控基因序列-GM-CSF基因
表達框；
所述E1A由端粒酶啟動子TERTp調控，所述E1B55K由天然E1B啟動子調控；
從序列5’至3’方向為：端粒酶啟動子TERTp-腺病毒E1A基因-天然E1B啟動子-E1B55K；
所述GM-CSF基因表達框位于所述天然E1B啟動子下游，由核糖體內部進入位點IRES連
接GM-CSF和E1B55K，實現共同表達；
從序列的5’至3’方向為：天然E1B啟動子-GM-CSF基因表達框-IRES序列-E1B55K。
2.權利要求1所述的溶瘤腺病毒重組載體的構建方法，其特征在于，包括：
1）、將decorin基因表達框序列插入到穿梭載體中得到第一重組穿梭載體；所述穿梭載
體為pShuttle-CMV；
2）、從TE-TP-E1A-GM-55K載體上酶切得到包含GM-CSF基因表達框的核酸片段，并將其
定向克隆至步驟1）得到的第一重組穿梭載體中，得到第二重組穿梭載體；
3）、將所述第二重組穿梭載體與復制缺陷型病毒載體同源重組，得到權利要求1所述的
溶瘤腺病毒重組載體；所述復制缺陷型病毒載體為pAdEasy。
3.一種溶瘤腺病毒，其由權利要求1所述的溶瘤腺病毒重組載體線性化后轉染至病毒
包裝細胞中進行包裝、擴增、純化后獲得；
所述腺病毒包裝細胞為HEK293細胞。
4.權利要求1述的溶瘤腺病毒重組載體及權利要求3所述的溶瘤腺病毒在制備用于治
療結腸癌的藥物中的應用。
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