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成纖維細胞的培養基及其制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-14
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710099729.2 
  • 技術(專利)名稱 成纖維細胞的培養基及其制備方法 
  • 項目單位 廣州潤虹醫藥科技股份有限公司
  • 發明人 車七石 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 褚蘭彤
  • 發布時間 2022-01-14  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種誘導性多能干細胞誘導成成纖維細胞的培養基及其制備方法。該培養基包括基礎培養液和添加物,所述基礎培養液為體積比為1:0.5~2的H?DMEM培養液和F12培養液;以在所述基礎培養液中的濃度計,所述添加物包括如下組分:非必須氨基酸、谷氨酰胺衍生物、胰島素、氫化可的松、轉鐵蛋白、亞硒酸鈉、成纖維細胞生長因子、雌二醇、黃體酮、8?溴環磷腺苷、人卵泡刺激素。該培養基能夠獲得較現有技術更高的成纖維細胞分化概率,并且能夠穩定傳代,提高細胞的增殖速度,為皮膚組織工程提供成纖維細胞的種子細胞來源,同時整個過程沒有用到血清,有效的避免了動物源性病原體帶來的風險,提高了臨床應用的安全性。
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  • 02

    說明書

    1.一種將誘導性多能干細胞誘導為成纖維細胞的培養基,其特征在于,由基礎培養液
    和添加物組成;所述基礎培養液為體積比為1:0.5~2的H-DMEM培養液和F12培養液;以在所
    述基礎培養液中的添加量計,所述添加物由如下組分組成:

    2.根據權利要求1所述的培養基,其特征在于,以在所述基礎培養液中的添加量計,所
    述添加物由如下組分組成:

    3.根據權利要求1或2所述的培養基,其特征在于,所述添加物還包括抗生素。
    4.根據權利要求3所述的培養基,其特征在于,所述抗生素包括在所述基礎培養液中添
    加量為0.05~0.2mg/mL的青霉素以及在所述基礎培養液中添加量為0.05~0.2mg/mL的鏈
    霉素。
    5.根據權利要求1或2所述的培養基,其特征在于,所述添加物還包括自由基清除劑。
    6.根據權利要求5所述的培養基,其特征在于,所述自由基清除劑為在所述基礎培養液
    中添加量為0.05~0.2mmol/L的β-巰基乙醇。
    7.權利要求1-6任一項所述的培養基的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
    按所述體積比混合H-DMEM培養液和F12培養液,得所述基礎培養液;
    將所述胰島素、氫化可的松、轉鐵蛋白、亞硒酸鈉、非必需氨基酸、谷氨酰胺衍生物、成
    纖維細胞生長因子、雌二醇、黃體酮、8-溴環磷腺苷,人卵泡刺激素添加至所述基礎培養液
    中,即可。
    8.權利要求1-6任一項所述的培養基在成纖維細胞培養中的應用。
    9.一種將誘導性多能干細胞誘導為成纖維細胞的方法,其特征在于,包括如下步驟:
    采用mTeSR1培養基對誘導性多能干細胞進行培養,當匯合度為75~85%時,消化為單
    細胞;
    取適量所述單細胞,以EB擬胚體形成培養基進行培養,形成擬胚體;
    將所述擬胚體接種至權利要求1-6任一項所述培養基中培養,即得成纖維細胞。
    10.根據權利要求9所述的將誘導性多能干細胞誘導為成纖維細胞的方法,其特征在
    于,所述擬胚體的培養條件為:采用CO2濃度為5~7%,溫度為37℃的培養箱培養24~50h。
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專利技術附圖

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